反面高尔基体在自噬体形成中的作用研究

自噬是真核细胞中广泛存在的降解和再循环系统，与细胞及机体的多种生理和病理过程密切相关。关于自噬体膜的来源的研究是当前自噬研究领域的热点和焦点问题。目前，有源自细胞内已存膜性结构和胞内原位合成两种学说，近来的研究结果多支持前者，但究竟来自细胞内何种膜结构，仍是众说纷纭。申请人的前期工作结果强烈提示反面高尔基体在自噬体形成中发挥重要作用。本项目拟在前期成果的基础上，在活细胞内通过特异性增强或阻断蛋白运输通路不同阶段的膜的转运，观察自噬体的形成以及自噬调节信号的活性，研究细胞内膜的转运与细胞自噬间的功能联系，确立反面高尔基体在自噬发生和调控中的地位及作用，证实反面高尔基体是自噬体膜的重要来源这一结论。本项目的研究结果，将为自噬体形成的基础研究提出新的见解，对解析自噬在细胞生理和病理过程中的作用和调控具有重要理论指导意义。

作为真核细胞中广泛存在的降解和再循环系统，近年来人们对自噬在多种生理和病理过程中的作用有了充分认识，但是关于自噬体膜的来源问题尚未解决。本研究中，我们提供证据表明，后高尔基体蛋白运输在自噬泡的形成中发挥关键作用。我们首次发现，促进蛋白运输通路中反面高尔基体至细胞膜的蛋白运输可诱导细胞内自噬泡的形成；在自噬发生的早期，LC3结合到发面高尔基体的特殊部位，并随后已出芽方式从反面高尔基体上形成LC3阳性囊泡；Clathrin及其适配蛋白AP1定位于饥饿和雷帕霉素诱导形成的自噬泡上；在反面高尔基体而非细胞膜上，失活AP1依赖的clathrin囊泡系统可以阻止自噬泡的形成。我们的结果表明，通过以AP1依赖的clathrin囊泡系统为自噬泡提供膜成分，反面高尔基体在自噬泡的形成中发挥不可或缺的作用。. 项目严格按计划实施并顺利完成，研究成果发表在细胞生物学权威杂志Journal of Cell Science，并被评为当期重点推荐论文。同时，在“中国细胞生物学学报”发表了相关综述文章。