斑马鱼Rb1基因在早期T淋巴细胞发育中的作用

T lymphocytes are key cellular components of acquired immune system and play essential roles in cell-mediated immunity. The formation of T cells occurs in the thymus where the hematopoietic progenitors migrated from the bone marrow undergo a series of developmental events including rearrangement of T cell receptors, positive selection and negative selection and mature into functional T cells. Many transcription factors and cytokines involved in these processes. The dysregulation of those transcription factors and cytokines will induce immunodeficiency(PID) or lymphoid leukemia.. Retinoblastoma 1（rb1）is a member of RB family, has been previously shown to regulate the terminal differentiation of blood cell. And the rb1 mutation was also be detected in lymphoid leukemia patients. Yet, the role of rb1 in lymphocytes development and the precise molecular cascade remains unclear. In previous study, we generated a rb1 zebrafish mutant by TALEN and show that the Rb1-deficient mutant fish exhibit a significant reduction of T cells during early development without interfering with the development of other hematopoietic lineages. In this project, we intends to use rb1 mutant to investigate the regulation pathway of Rb1 in the early development of T lymphocytes. And establish a immunodeficiency zebrafish model for find new diagnostic methods and treatment strategies.

T淋巴细胞是获得性免疫的关键细胞成分，并在细胞免疫中发挥重要作用。造血祖细胞从从骨髓迁移到胸腺后，经历一系列的发育事件（T细胞受体重排、阳性选择和阴性选择等）成为成熟T细胞。许多转录因子和细胞因子都参与这个过程当中。这些转录因子和细胞因子的调节异常会引起免疫缺陷病或淋巴白血病。.成视网膜细胞瘤1(rb1)是RB家族中的一员。之前研究表明rb1可以调节血细胞的终末分化。并且rb1基因突变也常报道出现在淋巴白血病患者中。然而,rb1对淋巴细胞发育的作用和分子机制仍不清楚。我们在前期研究中,通过TALEN技术获得了一个rb1斑马鱼突变体。初步结果发现在该突变体中早期T细胞明显减少，而其他造血细胞则发育正常。在本项目中，我们拟通过该rb1突变体，明确 Rb1 对 T 淋巴细胞早期发育的影响及调控通路，并建立一个免疫缺陷斑马鱼模型，为 Rb1 突变导致的血液疾病提出新的诊断方的诊断方法和治疗策略。

T淋巴细胞是获得性免疫系统的关键细胞成分，在细胞免疫中发挥重要作用。 T细胞发育发生在胸腺，其中95％的不成熟胸腺细胞将通过凋亡的方式被清除。先前的研究发现Zeb1（RB1靶基因之一）的突变会导致小鼠不成熟的T细胞减少。此外，有文章报道E2F1（一种RB1相互作用蛋白）可以通过干扰胸腺细胞凋亡来调节成熟T细胞发育。然而Rb1是否调节胸腺细胞在体内的发育还有待进一步研究。在这篇研究中，我们使用了斑马鱼模型来研究Rb1在T细胞发育中的作用。我们的研究结果显示，Rb1缺陷斑马鱼在早期发育过程中表现出T细胞的显著减少，而这种T细胞减少则是由于Caspase依赖性的不成熟T细胞的加速凋亡导致的。我们进一步发现，E2F1过表达与Rb1突变体的T淋巴细胞减少表型相似，并且敲低E2F1可以拯救Rb1缺陷突变体的表型。总的来说，我们的数据表明Rb1-E2F1-Caspase轴对于在T淋巴细胞成熟过程中保护未成熟T细胞免于凋亡至关重要。此外，鉴于rb1的体细胞缺失是CLL中最常见的染色体异常，阐明Rb1在不成熟T细胞凋亡调控中的作用机制将为肿瘤抑制与淋巴系统发育之间的联系提供线索。