基于中医“圆道”理论探索微重力干预下MSCs用于肿瘤免疫接种的实验研究

肿瘤免疫治疗作为临床新策略被寄予厚望,而肿瘤细胞抗原免疫原性弱是制约其运用于临床的瓶颈。如何提高肿瘤抗原簇的组装与表达,增强免疫系统的识别能力,成为攻克的重点。最新研究表明，利用干细胞的肿瘤抗原性进行免疫接种，机体可产生广泛的免疫应答从而抑制多种肿瘤产生,并提出接种效果与多潜能性直接相关。圆道作为中医理论框架模式，通过具化的"圆"形彰显事物原始、回归的特性,体现了形态与功能深层次的联系。我们研究表明,微重力（MMG）作用后骨髓间充质干细胞（MSCs）呈现圆形改变且多潜能性提高。.由此，本项目提出通过MSCs形态归圆提高多潜能性而实现肿瘤免疫预防接种的构想，拟采用MMG干预MSCs，灭活后预防接种小鼠，肺腺癌细胞移植后评价肿瘤生物学行为，SEREX技术分析抗原簇差异并进行适应性免疫分析，同时初步探索其分子机制。本研究首次提出干细胞形态归圆对其肿瘤免疫原性的影响,为肿瘤免疫治疗提供全新思路。

本研究拟采用模拟微重力（Modeled microgravity, MMG）促使成体干细胞（Mesenchymal stem cells, MSCs）进行形态干预促使其变圆，探讨圆形的MSCs的全细胞抗原对移植瘤的预防接种抑瘤作用。通过研究发现：.1. 骨髓间充质干细胞（MSCs）作为全细胞抗原对移植瘤的抑制作用：原代培养小鼠MSCs灭活获取全细胞抗原（WCAs），接种至BALB/c小鼠后获得免疫接种小鼠模型，以GFP-A549皮下移植荷瘤，发现WCAs接种抑制肿瘤生长，同时检测到Ki-67与PCNA表达下调。.2. MMG上调WCAs抑瘤作用：采用2-D回转模拟失重，获得MMG作用下的MSCs后获取WCAs。MMG可以明显提高WCAs的抑瘤效果； 证实其抑制与PCNA及Ki-67表达下降，且凋亡增加有关。同时，MMG并没有降低MSCs的分化性，其端粒酶的活性提高，并且分化转录因子Oct4, Sox2 及 Nanog表达都上调，提示其分化潜能可能提高。.3. MMG通过CTL途径上调WCAs的抑瘤作用：流式细胞术测脾细胞裂解得IL-2及γ干扰素表达上调，ELaspot 提示γ干扰素单细胞释放增加，IL-4单细胞释放无差别；提示MMG导致MSCs的WCAs的抑瘤作用是通过细胞杀伤作用而非体液免疫实现的。. 本研究首次以成体干细胞MSCs为候选瘤苗种子证实其有抑制肿瘤的作用，通过MMG干预使MSCs形态变圆，并使其免疫抗原的抑瘤效果增强，经过初步研究提示与CTL杀伤途径激活有关；本研究从形态烦人改变探讨了抗原抑瘤作用的变化，从侧面揭示了中医经典圆道理论的分子内涵。