miR-146与miR-200 在高脂诱导的大鼠肝脏胰岛素抵抗形成中的作用与机制

肥胖是胰岛素抵抗(IR)形成的重要基础,脂肪细胞分泌因子可激活炎症信号通路使靶器官产生IR，因此，研究细胞内炎症信号通路调控具有重要意义。我们利用高脂诱导的大鼠模型，经Solexa测序和qPCR，在IR大鼠肝脏中发现了几个表达升高的小RNA，与炎症信号通路关系密切。其中miR-146靶标TRAF6是TLR4信号通路关键蛋白，miR-200靶标ZEB1则是肥胖形成的抑制因子,与NFKB存在相互作用。我们推测miR-146升高可降低在IR形成中发挥作用的TRAF6活性，起到内源性负调节作用；miR-200则使ZEB1表达降低，促进肥胖发生，成为IR形成的推动者，两者作用于同一信号通路上下游分子,正负调节,机制新颖。我们将通过miRNA过表达和抑制技术研究两者在大鼠肝脏IR形成中的作用及机制，并使用Zucker大鼠模型研究其干预肥胖和胰岛素抵抗形成的作用。本课题将为IR形成及调节研究提供新思路。

在前期工作的基础上，深入研究miR-146a/b 和miR-200a/b 在肝脏胰岛素抵抗形成中作用和机制；并探讨这些miRNAs 的靶标分子与炎症信号通路和胰岛素信号通路的关系；另外，我们同时要观察miR-200a/b 及其靶标ZEB1 是否在肝脏脂肪沉积中起到作用，以促进肝脏胰岛素抵抗的形成。对照原定研究计划，本课题完成了miR-146 的研究工作；建立了miR-200b转基因小鼠，但是由于小鼠品系原因未能传代，无法进一步分析miR-200的作用；仅在原代miR-200b转基因小鼠基础上分析了肌肉组织中的信号通路改变；根据非酒精性脂肪肝的研究进展，在原计划基础上增加研究了小檗碱缓解非酒精性脂肪肝的工作和其他非编码RNA的研究内容。可惜的是，至今尚无标注该基金号的论文发表。培养5名硕士研究生。本课题取得的主要进展包括：（1）Ad-miR-146a尾静脉注射可以减轻HFD小鼠炎症反应，缓解非酒精性脂肪肝和胰岛素抵抗；（2）通过miR-200b转基因小鼠发现miR-200b在肌肉组织中的调控网络；（3）盐酸小檗碱抑制肠道菌群和NLRP3炎症小体进而缓解非酒精性脂肪肝；（4）初步证实miR-486可以调节靶基因Pten/Foxo1的表达水平从而影响VLDL的合成。