胃癌转移相关ADAMs家族成员的筛选及其分子机制研究

Metastasis is the main biologic character of gastric cancer, and is also the leading cause of gastric cancer-related death. A disintegrin and Metalloprotease (ADAMs) palys a crucial role in tumorigenesis and metastasis process of many kinds of malignant tumors , However, whether ADAMs take part in the process of metastasis of gastric cancer and the mechanisms remains unclear. Our previous studies indicated that the expression of ADAM8 was up-regulated in lymph node positive gastric cancer than that in lymph node negative gastric cancers. Therefore, based on the findings, we will intent to further campare the expression of the main ADAMs family members among the primary gastric cancers, metastasis postive lymph node and metastasis nagative lymph node by tissue microarray technique to conform the target-ADAMs family members. And then we will block the expression of the target- ADAMs in gastric cancer cells with high metastasis potential and increase the expression level of the target- ADAMs in gastric cancer cells with low metastasis potential in vitro experiment to detect the invasion and metastasis ability of gastric cancers, the change of signaling pathway proteins and finally conform the ADAMs associated signailling proteins and signailling pathways. The practical results of this work could illuminate the new molecular mechanisms of metastasis in gastric cancers and establish theoretical basis of diagnosis and therapy of lymph node matastasis in gastric cancer patients.

转移是胃癌的基本特征，也是临床绝大多数胃癌患者治疗失败和死亡的主要原因。去整合素-金属蛋白酶家族（ADAMs）在多种肿瘤的发生及转移过程中起关键作用，但其家族成员是否参与胃癌的转移过程及其机制尚不明确。在前期研究中我们发现ADAM8在淋巴结转移阳性胃癌中的表达程度高于淋巴结转移阴性胃癌，本研究拟在前期研究基础上进一步筛选同一患者胃癌原发灶、转移阳性淋巴结及转移阴性淋巴结中ADAMs家族主要成员的表达水平，确定1-2个与胃癌转移相关的目标ADAMs，并在体外试验中通过阻断高转移潜能胃癌细胞中目标ADAMs的表达以及提高低转移潜能胃癌细胞中目标ADAMs的表达，检测胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力以及信号蛋白表达谱的变化，试图寻找受目标ADAMs变化影响的信号蛋白及细胞信号传导通路，阐明目标ADAMs影响胃癌细胞发生增殖、迁移及侵袭的相关机制，并为胃癌转移的防治提供新的思路。

转移是胃癌的基本特征，去整合素-金属蛋白酶家族（ADAMs）在多种肿瘤的发生及转移过程中起关键作用，但其家族成员是否参与胃癌的转移过程及其机制尚不明确。课题组在前期研究中发现ADAM8在淋巴结阳性胃癌中的表达程度高于淋巴结阴性胃癌。据此，本研究通过检测同一患者胃癌原发灶、癌旁正常组织、转移阳性淋巴结及转移阴性淋巴结中ADAMs家族主要成员的表达水平，确定1个与胃癌转移和预后相关的ADAMs，并在体外并在体外试验中通过阻断高转移潜能胃癌细胞中目标ADAMs的表达以及提高低转移潜能胃癌细胞中目标ADAMs的表达，检测胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力以及信号蛋白表达谱的变化，试图寻找受目标ADAMs变化影响的信号蛋白及细胞信号传导通路。结果表明，ADAM9 和ADAM17在胃癌和阳性淋巴结中显著高表达，并且ADAM17 与预后具有显著相关性，此外ADAM17 在高度转移潜能细胞中高表达，经过ADAM17 过表达的BGC-823细胞的活力增加，敲除ADAM17的SGC-7901细胞的活力和转移能力降低。经过GSEA分析显示ADAM17 与notch和Wnt通路具有相关性。同时，在前期研究中我们应用PPA发现9个蛋白在胃癌中表达高于正常组织，据此我们呢通过组织芯片技术进一步9个蛋白的表达情况，并且研究差异性蛋白与临床病理学特征之间的关系及其对胃癌信号通路的影响，并试图通过生存特征分析，检验这些蛋白与预后相关性并建立预后预测模型。结果发现在9种蛋白质种8中存在差异性表达，这些蛋白质分别与肿瘤大小、组织学分型、脉管浸润等临床病理学状态相关，可能作为判断胃癌进展、分期和预后的分子标志物。经过生存特征分析后发现5个蛋白可以将患者分为两组，两组间在淋巴结转移程度和TNM分期之间存在差异特性，并且5个蛋白组成的分组是影响胃癌患者预后的独立因素。特别是经过因子分析后，建立的4个因子模型，即因子1（蛋白质因子）、因子2（病理学因子）、因子3（临床因子）和因子4（组织学分型）是胃癌患者生存的独立性影响因素，是行之有效的胃癌患者预后预测系统。