钙蛋白酶系统调控猪体蛋白降解的信号途径研究

用实时PCR法测定钙蛋白酶抑制蛋白异构体、肌球蛋白重链异构体及钙蛋白酶系统相关蛋白的mRNA丰度；用定量免疫印记法测定钙蛋白酶、钙蛋白酶抑制蛋白（CAST）、肌球蛋白重链异构体、钙调磷酸酶、NFAT、p94、IκB-α、NFκB、肌钙蛋白、肌结合蛋白、肌连接蛋白、伴肌动蛋白等的量；用GST融合蛋白结合分析考察CAST与NFκB和CREB的"蛋白-蛋白"相互作用；用凝胶迁移检测（EMSA）方法检测MyoD，NFκB，CREB与CAST外显子1u启动子序列的"DNA-蛋白质"相互作用，用N15甘氨酸示踪方法测定体蛋白降解速率。项目考察不同饲粮蛋白水平和不同饲喂方式对生长肥育猪体蛋白降解、钙蛋白酶系统基因表达以及"钙调磷酸酶-NFAT"信号途径和"p94-NFκB"信号途径的影响。明确这两种信号途径在钙蛋白酶系统调控猪体蛋白降解过程中的作用，从分子水平揭示钙蛋白酶系统调控猪体蛋白降解的机理。