通过肾虚不同状态下对耳蜗MAPK信号通路的调控探讨肾主耳的机制研究

“The Kidney controlls the ears, and ears are the specific orifices of Kidney”.For a long time,the research of the Kidney controlling the ears is still on the basis of a few isolated contact material without new progress and cannot interpret modern biology mechanism and the scientific intension..We think that the visera-Kidney and the orifices-ears maybe depend on certain structures and substances and play functions by certain signal pathways.On the basis of our previous researches,we will observe the morphological change from the level of tissues and organs, ERK1/2,JNK,P38 of the MAPKs with the methods of immunohistochemistry,wester blotting, in-situ hybridization and RT-PCR from the level of protein and gene leve of the Kidney and cochlea through Kindey-Yin deficiency and Kindey-Yang deficiency model.Then we will analyse of the relevance of the Kidney and cochlea in order to provide more laboratory evidences between the Kidney and the ears and enrich theory Zang and Orifice of TCM. At the same time we will discuss the effect of Gushen Peiyuan Recipe to provide theoretical basis of the treatment of deafness..

“肾主耳，在窍为耳”。长期以来肾主耳的研究仍停留在几个孤立联系的物质基础上，没有取得新的进展，不能很好地阐释中医肾主耳理论的现代生物学机制及科学内涵。我们认为藏与窍功能的发挥须通过一定的通路相互联系，使机体成为统一的整体。那么脏腑-肾与官窍-耳是否在MAPK信号通路上存在着相互关联值得深入研究。基于此申请人在前期研究的基础上，通过肾虚不同状态下肾阴虚、肾阳虚造模，从组织器官水平观察肾阴虚、肾阳虚后肾脏、耳蜗的形态学变化；采用免疫组化法、western印迹法、原位杂交和RT-PCR方法，分别从蛋白水平和基因水平，以MAPK信号通路中关键因子ERK1/2、JNK、P38作为核心指标研究肾虚不同状态下肾脏和耳蜗的功能，从而分析肾脏、耳蜗的相关性，为肾与耳关系的现代诠释提供实验依据，丰富中医的藏窍理论。同时探讨以补肾活血为主的方药——固肾培元方的干预作用，为日益增多的耳聋疾病临床辨治提供理论基础。

“肾主耳……在窍为耳”。长期以来肾主耳的研究仍停留在几个孤立联系的物质基础上，没有取得新的进展，不能很好地阐释中医肾主耳理论的现代生物学机制及科学内涵。我们认为藏与窍功能的发挥通过一定的通路相互联系，使机体成为统一的整体。.那么脏腑---肾与官窍--耳是否在MAPK信号通路上存在着相互关联值得深入研究。本课题在前期研究的基础上，通过建立肾阴虚、肾阳虚大鼠模型，从整体水平、组织器官、蛋白水平、分子、基因水平探讨肾虚不同状态下对肾脏及耳蜗MAPK信号通路中蛋白表达的影响，进而分析肾开窍于耳的部分分子机制。研究结果表明，肾阴虚、肾阳虚大鼠听力均下降，肾脏和耳蜗在不同程度上发生病理改变；免疫组化法、western-blot印迹法以及原位杂交法都从不同的方面定性定量的证明了核心指标JNK、P38在肾虚模型组大鼠的耳蜗及肾脏中表达增强，而ERK1/2则相应的降低；RT-PCR则证明P38mRNA和JNKmRNA表达较空白组在一定程度上增强，ERK1/2则相应的降低。运用中药补肾培元方灌胃能有效提高大鼠听力，改善肾虚大鼠肾脏及耳蜗的组织形态结构，显著降低JNK和P38的表达，提高ERK1/2的表达。因此，我们认为肾虚可以通过影响耳蜗MAPK信号通路相应蛋白的表达从而影响鼠耳的功能，由此推出肾虚是导致耳部疾病产生的重要原因之一。中药能有效改善大鼠的肾虚状态，在一定程度上改善大鼠的肾脏及耳部功能，为肾与耳关系的现代诠释提供实验依据，丰富中医的藏窍理论，为日益增多的耳聋疾病临床辨治提供理论基础。