慢性乙型肝炎及非酒精性脂肪性肝病“湿热证”的代谢网络研究

“Syndrome” is the core of TCM clinical diagnosis and treatment. Whether different diseases with the same syndrome has the common biological basis is a key scientific problems of TCM syndrome theory in modern research. Our previous study shows that the metabonomics can reflect the feature of whole body dynamic change, so in this study,we hypothesize that “the pathological material basis of damp-heat syndrome can be revealed by the the metabolic network”.In this study,typical damp-heat syndrome of chronic Hepatitis B and Nonalcoholic steatohepatitis are studied,non-damp-heat syndrome of above two diseases and healthy subjects are treated as controls, GC/MS(mass spectrometry combined with gas chromatography) and LC/MS(mass spectrometry combined with liquid chromatography) test are used to analyze the metabonomics group changes of blood and urine sample between patients and health persons.Then we will use multi-dimensional statistical analysis techniques to explore the commonness and personality changes of damp-heat syndrome. Further more, SHQGKL, an effective traditional Chinese medicine of damp-heat syndrome, will be used to treated with the patients for damp-heat syndrome,then analyze the metabolites change before and after the intervention, as well as its relation ship to the change of syndromes.So that , we can clear the true value of related metabolites group in judging damp-heat syndrome, build the characteristic metabolites map of the damp-heat syndrome and reveal the main pathological basis of it, and explain the scientific connotation of TCM different diseases with the same syndrome from metaboilic level, and provide the detectability index in judging damp-heat syndrome and evaluating clinical efficacy.

“证”是中医理论与临床诊疗的核心，证的生物学基础及其演变规律是目前亟待解决的关键科学问题之一。基于课题组既往研究所示代谢组学可反映“证”的整体、动态变化特征，本项目提出“从机体代谢网络的变化揭示湿热证的物质基础，并阐释其相应的生物学内涵”的科学假说。拟以两种疾病（慢性乙型肝炎和非酒精性脂肪性肝病）典型的湿热证患者为研究对象，以相应疾病的无明确证可辨的隐证患者和正常人为对照，运用代谢组学技术检测、分析血液和尿中的代谢物组的变化，结合单维和多维统计分析方法，明确两种疾病湿热证的共同物质基础及差异性代谢物谱。并基于此，以临床常用治疗这两种湿热证的双虎清肝颗粒进行干预研究，基于中医“方证相应”的基本思维，分析在干预作用下代谢物质谱的变化轨迹及其与“证”变化的关联性，解析湿热证发生变化的特征性物质基础和代谢网络，揭示“湿热证”生物学变化的科学内涵，为中医“证”的现代评价与分类提供转化应用的基础。

“证”是中医理论与临床诊疗的核心，证的生物学基础及其演变规律是目前亟待解决的关键科学问题之一。本研究以临床常见的慢性乙型肝炎（CHB）及非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）两种肝病典型的湿热证为研究对象，运用UPLC-MS/MS靶向代谢组学技术对血清样本进行定性定量分析，①探索两种疾病湿热证中的共性物质基础，筛选出湿热证的特征性代谢物；②在此基础上，临床再选择两种疾病典型湿热证患者，从“方证相应”的中医学研究思路出发，应用治疗两种疾病湿热证有效的双虎清肝颗粒进行干预，观察干预作用下湿热证的治疗调节效应（证候改变），并分析前期筛选的湿热证代谢物质的变化轨迹；③进一步明确湿热证特征性的代谢物质并揭示其主要生物学变化的科学内涵。研究发现，与相应CHB及NAFLD疾病隐证者与健康者比较，两种疾病湿热证存在9个变化趋势一致的共性代谢标志物，其中3-羟基丙酸、吡啶甲酸、苯甲酸、乙醇酸、异丁酸、硒蛋氨酸、1,6-二磷酸果糖上调，丙酸、戊酸下调；共同代谢途径为丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢及丙酸盐代谢，这些小分子化合物可能是湿热证的潜在标志物。基于双虎清肝颗粒对两种疾病湿热证4周临床干预的结果，验证了前期筛选的标志物中的3-羟基丙酸、吡啶甲酸、硒蛋氨酸、丙酸4个物质及1条通路（丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢）可能为湿热证的优选潜在标志物。最终发现湿热证的代谢机制可能为氨基酸代谢、能量代谢、肠道菌群、免疫炎症反应的异常，双虎清肝颗粒可能通过减轻炎症反应、调节肠道菌群、改善氨基酸代谢、影响能量代谢来调控湿热证。研究表明湿热证“异病同证”存在证候的生物学基础，通过临床干预验证进一步明确了湿热证的生物标志物，为湿热证的客观化研究及临床治疗提供有力依据。发表受本项目资助的中文核心期刊文章2篇，SCI论文1篇。结合项目培养研究生5名，其中已毕业研究生2名，在读研究生3名。参加国内会议3次，会议及壁报交流2次。