基于方证生物网络的慢性乙型肝炎肝胆湿热证潜在标志物研究

Traditional Chinese medicine syndrome need to be objective and quantitative, which is one of the key scientific problems to breakthrough. Previous studies have suggested that there are specific biological basis (different from disease) existed in chronic hepatitis b liver and gallbladder damp-heat syndrome patients in the gene transcription level, and have found the candidate differentially expressed genes with specific biological functions, which needs further explain the mechanism of the syndrome, and selects promising candidate clinical biomarkers. .In view of the similarities of the syndrome and biological networks, network analysis method may be an effective means to reveal the connotation of syndrome and screen syndrome markers. Thus, This study put forward the hypothesis based on previous work that "there are specific pathogenesis of syndromes, the "co-module" between syndrome molecular biology network and drug target network may have syndrome potential biomarkers". In chronic hepatitis b liver and gallbladder damp-heat syndrome as the research object, using transcriptome detection technology and bioinformatics analysis to: ①construct chronic hepatitis b liver and gallbladder damp-heat syndrome characteristic molecular biology network to explain the pathogenesis; ②focus the key nodes of "co-module" between syndrome network and drug target network through clinical intervention to get the potential biomarkers and initially verified, which will provide modern scientific basis for later syndrome biomarker research.

证候的客观量化是中医学有待突破的关键科学问题之一，前期研究已经提示慢性乙型肝炎肝胆湿热证在基因转录层面存在有别于疾病的特有生物学基础，并发现了具有特定生物功能的证候差异基因群，有待于进一步深入阐释证候内涵，筛选具有临床应用前景的证候生物标志物。.鉴于证候与生物网络的相通性，网络分析方法是揭示证候内涵和筛选证候标志物的有效手段，因此，本研究在前期工作基础上，提出“证候存在特定的病理机制，证候分子生物学网络与对证药物靶标网络的“共模块”中潜在证候的生物标志物”的假说，以慢性乙型肝炎肝胆湿热证为研究切入点，借助转录组学检测技术和生物信息分析方法，①构建慢性乙型肝炎肝胆湿热证的特征性分子生物学网络，阐释证候的病理机制；②通过临床干预，聚焦证候网络与药物靶标网络共模块中的关键节点，得到潜在生物标志物群并初步验证，为后期大规模临床验证以及开发具有证候判定和疗效评价功能的证候标志物提供依据。

中医证候的客观化是有待突破的重大科学问题，本研究以慢性乙型肝炎肝胆湿热证为研究切入点，借助转录组学检测技术和生物信息分析方法，①构建慢性乙型肝炎肝胆湿热证的特征性分子生物学网络，阐释证候的病理机制；②构建茵陈蒿汤入血成分的药物靶标网络，聚焦证候分子生物学网络与对证药物靶标网络的“共模块”；③通过临床干预，对证候网络与药物靶标网络共模块中的关键节点进行初步验证。.研究发现，与慢性乙型肝炎非肝胆湿热证和健康志愿者相比，慢性乙型肝炎肝胆湿热证的差异基因主要涉及细胞死亡和生存、癌症相关的有机体损伤和异常、细胞周期、细胞间信号传输、免疫性疾病或炎症反应、其他疾病相关的有机体损伤和异常、细胞形态、代谢紊乱等生物功能方面，排名前5的信号通路为癌症的分子机制通路、粒酶B信号、细胞毒性T淋巴细胞介导的靶细胞凋亡、亨廷顿病信号通路和紧密连接信号通路。.慢性乙型肝炎肝胆湿热证背景证候分子生物学网络与对证药物靶标网络的“共模块” 在生物功能富集方面，主要涉及细胞死亡和生存、有机体损伤和异常、细胞周期、免疫性疾病或炎症反应、代谢紊乱等方面。最显著的前5个生物学功能是腹部癌症、碳水化合物的积累、UDP-D-葡萄糖的积累、UDP-N-乙酰葡糖胺的积累和UDP-半乳糖的积累。前5个通路是癌症的分子机制通路、ATM信号通路、Polo样激酶的有丝分裂作用、PKR在干扰素诱导和抗病毒反应中的作用和GNRH信号通路。.对慢乙肝肝胆湿热证患者进行为期4周的临床干预，对治疗前后的共模块中的关键节点进行初步验证，得到慢乙肝肝胆湿热证的潜在生物标志基因39个，为后期大规模临床验证以及开发具有证候判定和疗效评价功能的证候标志物提供依据。.研究说明证候存在特定的病理机制，证候分子生物学网络与对证药物靶标网络的“共模块”中潜在证候的生物标志物，发表论文7篇，培养研究生2名，国内会议学术交流2次，为中医证侯的客观化提供了科学依据。