内皮祖细胞通过Galectin1-Neruopilin-1途径发挥内膜保护作用预防移植静脉再狭窄及其机制研究

Vascular intimal hyperplasia caused by vascular endothelial cell injury and dysfunction of autogenous vein graft are main factors of postoperative re-stenosis. The quick restoration of the structure and the biological function of damaged vascular endothelial cells, namely re-endothelialization, is crucial for the prevention of restenosis. Endothelial progenitor cells (EPC), which has a potency of orientated homing and differentiation as vascular endothelial cells, has been widely used for repair of damaged endothelium. Galectin-1 and Neuropilin-1 are involved in angiogenesis and re-endothelialization in nerve system and tumor tissues. We speculate that EPC can be attracted to the injured endothelial and promote re-endothelialization in the vein graft. SaRNA and CRISPR-ON technique will be applied to up-regulate GAL1 in vein graft, and the intimal protection will be recorded and the possible mechanism involved will be recorded. This finding will provide a new insight on the research of prevention of re-stenosis of autogenous vein graft, as well as a promising therapeutic target.

移植静脉血管内皮细胞损伤和功能失调导致内膜增生是术后再狭窄的重要因素，尽快修复受损血管内皮细胞结构及其生物学功能即再内皮化是防治再狭窄的关键。内皮祖细胞(EPC)具有定向归巢、高效分化为血管内皮细胞的潜能，已广泛应用于受损内皮的修复。半乳糖凝集素1（GAL1）、神经菌毛素1（NRP1）均可表达于多种组织，具备免疫抑制功能，在胚胎神经系统、血管内皮系统发育、分化过程中起重要作用。在神经系统、肿瘤组织中GAL1-NRP1途径介导血管生成和受损血管修复。因此我们设想：在移植静脉适应动脉血流过程中，GALI-NRP1信号可能发挥与其在神经系统类似的功能，促进内膜修复，抑制桥血管内膜异常增生。本研究拟利用SaRNA,CRISPI-ON技术上调移植静脉内皮GAL1的表达，通过GAL1-NRP1信号募集EPC，发挥内膜保护功能，减轻移植静脉再狭窄。此研究将为预防移植静脉再狭窄提供临床可行的治疗策略。

移植静脉血管内皮细胞损伤和功能失调导致内膜增生是术后再狭窄的重要因素，尽快修复受损血管内皮细胞结构及其生物学功能即再内皮化是防治再狭窄的关键。内皮祖细胞(EPC)具有定向归巢、高效分化为血管内皮细胞的潜能，已广泛应用于受损内皮的修复。半乳糖凝集素1（GAL1）、神经菌毛素1（NRP1）均可表达于多种组织，具备免疫抑制功能，在胚胎神经系统、血管内皮系统发育、分化过程中起重要作用。在神经系统、肿瘤组织中GAL1-NRP1途径介导血管生成和受损血管修复。申请者从RFP-C57BL/6小鼠的外周血中分离RFP-EPC细胞，通过CCK-8和Transwell实验发现外源性的GAL1对RFP-EPC生长迁移和分化的正调控作用；其次，从正常C57BL/6小鼠获取颈外静脉段，与RFP-EPC共培养后发现静脉段可以诱导RFP-EPC增殖和迁移，同时促进其内皮细胞功能，接着通过HE染色探讨在动脉血流环境下RFP-EPC对静脉段内膜增生的影响，发现RFP-EPC可以通过GAL1-NRP1信号抑制静脉段上细胞外基质和炎症相关因子，从而抑制静脉段的内膜增生，初步判断为GAL1-NRP1信号促进了RFP-EPC中内皮功能因子eNOS和HO-1的分泌从而达到对静脉段的修复作用；最后，利用过表达载体pCI-GAL1转染小鼠静脉上调移植静脉内皮GAL1的表达，通过GAL1-NRP1信号募集EPC，发挥内膜保护功能。此研究为预防移植静脉再狭窄提供临床可行的治疗策略。