亲环素A在斜纹夜蛾细胞免疫抑制反应中的作用机理

It is not clear that cyclophilin A (CyPA) inhibits the host cellular immune system via inducing the host granulocytes apoptosis. As an immunosuppression protein, CyPA plays an important role in immunocyte response and apoptosis of mammalian cell. Based on the present research and our result, we propose the hypothesis that CyPA secreted by hemocytes during parasitize contribute to the granulocyte apoptosis, which resulting in the host immunosuppression by CyPA or CyPA-AIF signal pathway. And so, the parasitoids are normally protected from the host immune system. The further investigation will focus on three questions. The first one is examining the interrelation of host guanulocyte apoptosis and CyPA in vivo. The second one is testing the migration of CyPA from the cytoplasm to nucleus. The last one is investigating the interaction of CyPA and DNA degradation. These research can contribute to find the molecular mechanism of CyPA participating in the host immunosuppression.

茧蜂在早期寄生过程中通过多分DNA病毒诱导斜纹夜蛾粒细胞的凋亡来抑制寄主的细胞免疫。但在随后的发育中还有何种蛋白参与免疫抑制至今还不清楚。亲环素A（cyclophilin, CyPA）是一个免疫抑制蛋白，根据其在哺乳动物中的研究成果发现，CyPA在炎症免疫反应和诱导细胞凋亡过程中发挥着重要作用。本项目结合哺乳动物研究和本人前期研究结果的基础上提出科学假说：茧蜂在寄生过程中通过幼虫本身以及携带的病毒诱发了CyPA的分泌，通过CyPA或CyPA-AIF信号通路导致寄主粒细胞发生凋亡，从而抑制寄主的免疫反应，保护寄生蜂幼虫在寄主体内的顺利发育。本项目拟从三个层次加以验证，首先确定CyPA与粒细胞凋亡的相关性；其次证明CyPA能够从细胞质迁移入细胞核内并与DNA结合；最后检测CyPA与染色体DNA降解的相互关系。从而揭示CyPA参与细胞免疫抑制的分子机制，为斜纹夜蛾的生物防治提供一个新的分子靶标。

在茧蜂寄生斜纹夜蛾幼虫的过程中，茧蜂病毒抑制寄主细胞免疫反应的分子机制目前还不是很清楚。研究发现在茧蜂寄生后的第六天寄主血细胞发生凋亡，同时伴随CypA的表达显著升高。通过提取茧蜂病毒粒子感染Hi5细胞，24h后CypA表达升高，细胞发生凋亡，当过表达CypA后，也观察到同样的现象；而沉默或抑制CypA时，则可以补救茧蜂病毒诱导的细胞凋亡。在茧蜂病毒诱导Hi5细胞凋亡的过程中，还可以观察到CypA和AIF同时从细胞质中转移到细胞核中，两者发生了共定位。提取的细胞基因组电泳结果显示，基因组DNA发生了片段化。这些结果提示，在茧蜂寄生斜纹夜蛾的过程中，CypA-AIF信号通路可能是茧蜂病毒诱导寄主血细胞凋亡的通路之一。以上结果也为进一步揭示昆虫细胞免疫抑制反应的分子机理提供有益的线索。