已完成全部研究计划:1心钠素基因克隆:提取胎儿脑总RNA,将其反转录成cDNA,用正义和反义寡聚核苷酸,获得含有信号肽序列的人ANF cDNA。2应用基因重组技术将人ANF cDNA重组入真核表达载体pcDNA3中,并含有CMV启动子和“poly A”尾巴。经在JM109大肠杆菌中扩增,获得大量的pcDNA3/ANF质粒。3用基因缝线携带pcDNA3/ANF导入SHR。肾性高血压和用一氧化氮合酶阻断剂的高血压大鼠骨骼肌,观察到具有明显降压和延缓血压升高作用。并发现转基因的大鼠骨骼肌内有人ANF mRNA表达;用免疫组化和Western blot发现转基因的骨骼肌内有人ANF的蛋白存在;而放免法证明,转基因大鼠血ANF水平明显升高,而尿钠和尿量也明显增加。通过本研究必将为高血压的基因治疗提供一条新的参考模式。
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数据更新时间:2023-05-31
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