HPV 6和11 E2基因多态性与复发性呼吸道乳头状瘤病的相关性研究

复发性呼吸道乳头状瘤病（RRP）是儿童最常见的呼吸道肿瘤，具有反复复发和向下呼吸道侵袭性生长的特性，严重影响儿童的健康，目前尚无有效手段预防肿瘤的复发。人乳头状瘤病毒HPV6和11被认为是本病的主要致病原，其致病机制可能是HPV基因的复制和表达干扰了宿主细胞的分裂与增殖，HPV E2蛋白作为病毒转录的调控蛋白在其中的作用倍受关注，但具体机制不明。本研究拟在前期工作的基础上，应用Solexa基因测序技术分别对HPV6和HPV11阳性标本中的HPV E2基因进行全基因组测序，探索HPV感染类型与RRP发生的关联性，筛选有意义的目的基因；通过体外实验，分析筛选出的目的基因对上皮细胞系的影响，探讨HPV6和11 E2基因的型间变异体调控人上皮细胞周期的可能机制，期望为筛选影响疾病严重程度及预后的生物标志物提供理论依据，并为进一步的疫苗研制和开发有效的治疗手段奠定基础。

本研究共搜集了240例儿童型复发性呼吸道乳头状瘤（Juvenile Onset Recurrent Papillomatosis，JORRP）患儿临床信息与肿瘤标本，并进行人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus,HPV）型别测定，发现患者HPV感染型别与临床特征间存在一定联系。应用Solexa高通量测序方法对部分标本进行HPV全基因组测序，应用第一代测序方法对部分标本HPV E2基因进行测序，并对个体间基因突变进行总结和分析，发现HPV基因高度保守。构建含有HPV E2基因的重组质粒，进行体外细胞培养，发现E2基因参与细胞周期的调控，促进细胞增值。