柴黄益肾颗粒通过TGF-β/Smad信号通路干预糖尿病肾病的机制研究

柴黄益肾颗粒是我们在既往国家自然基金资助项目研究基础上，开发的一个六类中药制剂。我们前期研究发现，该药物能够抑制TGF-β1及胶原的表达而且具有一定的抗纤维化作用。本研究拟利用自发性2型糖尿病肾病OLETF大鼠模型和单侧肾切除加链脲佐菌素（STZ）诱导的1型糖尿病肾病大鼠模型，观察柴黄益肾颗粒对糖尿病肾病肾小球硬化和肾小管间质纤维化的防治作用；通过髙糖培养的野生型、高表达型和基因敲除Smad2、Smad3和Smad7肾小球系膜细胞，深入研究柴黄益肾颗粒及有效成分调控TGF-β/Smad通路的作用靶点。进一步阐明柴黄益肾颗粒防治糖尿病肾病的作用机理，为糖尿病肾病的有效防治提供科学依据。

糖尿病肾病是糖尿病严重的微血管并发症，TGF-β/Smad信号通路是糖尿病肾病发展为肾脏纤维化的关键机制，但是到目前为止，糖尿病肾病仍无有效治疗措施。课题组以自主开发的六类新药--柴黄益肾颗粒为研究对象，首先通过单侧肾切除合并链脲佐菌素诱导的1型糖尿病肾病大鼠模型，灌胃给药20周，发现柴黄益肾颗粒能够显著减少24h尿蛋白；改善肾小球硬化指数和肾小管纤维化指数，降低细胞外基质如I型胶原、IV胶原和纤粘蛋白的表达；减轻炎症反应，降低炎性因子TNF-α和MCP-1的表达，从而明确其对糖尿病肾病的治疗作用；继而从TGF-β1/Smads信号通路入手，阐明了柴黄益肾颗粒能够下调TGF-β1及其受体TβRII和p-TβRI水平，上调Smad7表达，从而有效抑制NF-κB依赖的炎症通路和Smad2/3依赖的纤维化通路激活这一关键机理；同时建立代谢组学平台，从小分子代谢物角度发现降低马尿酸等有机酸分子在肾脏中的集聚，是降低TGF-ß1 表达减轻肾脏损害的重要机制；为进一步揭示柴黄益肾颗粒的治疗糖尿病肾病的中医内涵，课题组根据中医“肝肾同源理论”开展药物改善糖尿病肾病肝脏损害的作用研究，发现“肝肾同治”是柴黄益肾有效治疗糖尿病肾病的特色。此外，课题组成功建立了基因重组质粒构建和转染研究平台，并开展了糖尿病肾病相关基因在疾病进展中的作用研究，为从下一步分子生物学水平探讨中药作用机制奠定良好基础。.本项目共发表核心期刊论文11篇，SCI论文1篇，待发表SCI论文3篇，获得中华中医药学会科技进步奖二等1项，培养硕士研究生4人，博士研究生5人，超额完成项目任务。