大黄素调控BMP-7/TGF-β1对卵巢癌细胞上皮-间质转化的潜在作用

The early metastasis is one of the difficulties in clinical treatment of ovarian cancer. We identified that emodin could inhibits the metastasis of ovarian cancer cells and regulates the EMT process. The mechanisms is not clear. The results of our preliminary experiments shown that the expression of BMP-7 in metastatic tumor organ is significantly higher than in ovarian cancer tissues in situ.It reminds that BMP-7 may play an important role in the metastasis of ovarian cancer cells. In the meantime, we found that emodin could decrease the expression of BMP-7 in ovarian cancer cells. This might be related to its ability to inhibit ovarian cancer invasion. On the basis of previous foundings, we want to do further research with: 1. The expression of BMP–7、TGF-beta 1 、Smads in ovarian cancer and normal ovarian epithelial and their roles in the invasion process; 2. Do in vivo and in vitro tests to clear the effect of emodin in inhibiting the invasion of ovarian cancer cells ,We are trying to explain the mechanism of emodin to regulate the EMT factors by intervening BMP-7 and (or) TGF-beta 1. The research results will provide reference for TCM prevention and treatment of ovarian cancer metastasis and promote the clinical application of emodin.

早期盆腹腔转移是卵巢癌临床治疗难点之一。课题组发现大黄素能抑制卵巢癌细胞的侵袭转移，调控其上皮-间质转化（EMT）过程，但具体机制不清。预实验发现骨形态发生蛋白-7（BMP-7）在转移肿瘤组织的表达较原位卵巢癌组织显著升高，提示BMP-7在卵巢肿瘤的侵袭转移中发挥重要作用，而大黄素可以降低BMP-7的表达。课题组推测：大黄素可以通过降低BMP-7的表达来抑制卵巢癌细胞侵袭。拟进一步研究：1. BMP-7/TGF-β1/Smads在正常卵巢、肿瘤组织中的表达及在转移中的作用及机制；2.体内外实验研究大黄素对卵巢癌细胞EMT的抑制作用，正、反向施加BMP-7和（或）TGF-β1干预，深入探讨大黄素调控BMP-7/TGF-β1/Smads通路对卵巢癌细胞EMT过程的影响。该研究结果将为中药防治卵巢癌转移提供可资借鉴的研究思路与方法，对促进大黄素临床推广应用具有重要的理论意义。

早期盆腹腔转移是卵巢癌临床治疗难点之一。课题组发现大黄素能抑制卵巢癌细胞的侵袭 转移，调控其上皮-间质转化（EMT）过程，但具体机制不清。本实验通过免疫组化、Western Blot、QRT-PCR、Transwell、Wound healing test等方法，研究大黄素对卵巢肿瘤细胞侵袭转移的影响，并研究骨形成蛋白-7（BMP-7）及其下游因子在其中的作用及可能机制。结果表明：① BMP-7、TGF-β1、SMADs1,5,8在卵巢上皮性浆液性肿瘤中表达较正常卵巢上皮组织中升高，并与肿瘤细胞的侵袭转移存在相关性；② 不同浓度大黄素处理后，均能够抑制卵巢上皮性肿瘤细胞的增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，同时可以抑制上皮性卵巢癌细胞上皮-间质转化的过程，降低N-cadherin、Vimentin的表达，升高E-cadherin的表达，对肿瘤细胞的侵袭转移起到抑制的作用；③ 为明确BMP-7在上皮性卵巢肿瘤侵袭转移中发挥的作用及其下游通路，课题组通过过表达及敲除卵巢肿瘤细胞中BMP-7的表达，研究BMP-7对卵巢肿瘤细胞转移的作用及意义，并检测BMP-7下游蛋白的改变，结果显示BMP-7过表达促进肿瘤细胞侵袭，而敲除BMP-7则可以显著降低肿瘤细胞的侵袭转移能力，由此可以表明BMP-7/TGF-β1/SMADs 通路在卵巢癌 EMT的过程中发挥重要作用；④ 研究BMP-7在大黄素对卵巢上皮性肿瘤上皮-间质转化潜在作用中可能发挥的作用及机制，大黄素处理BMP-7过表达和/或敲除的卵巢肿瘤细胞，结果显示BMP-7过表达可以消除大黄素对肿瘤细胞侵袭转移能力的抑制作用，发现BMP-7/TGF-β1/SMADs通路与大黄素对上皮性卵巢肿瘤细胞侵袭转移作用的抑制有相关性； ⑤ 在HUVEC细胞中过表达BMP-7，可以促进小管生成，促进血管生成，而降调BMP-7的表达则可以降低小管的生成。实验结果表明BMP-7在上皮性卵巢肿瘤细胞的侵袭转移中具有重要作用，大黄素可以通过调节BMP-7的表达来抑制卵巢肿瘤细胞的侵袭及转移。