脆性位点基因WWOX在乳腺癌内分泌治疗耐药中的作用机制研究

Breast cancer is a hormone dependent cancer which severely threats the health of women and endocrine therapy has become an important choice for adjuvant and palliative postoperative treatment of advanced breast cancer. However, resistance to endocrine therapy has become a thorny issue; therefore, the mechanism underlying endocrine therapy resistance has aroused great concern among researchers. Fragile site gene WWOX is involved in regulation of steroid hormone formation, and is closely related to estrogen receptor (ER). Hence, it may be important to address the role of WWOX in drug resistance to breast cancer endocrine therapy. Unfortunately, WWOX-involved resistance to endocrine therapy has been rarely reported. Our previous study found that WWOX was significantly decreased in endocrine therapy-resistant breast cancer cell lines and tissues and that WWOX overexpression in the drug-resistant cell lines resulted in the decrease of the drug resistance of these cell lines. In addition, endocrine therapy with tamoxifen or exemestane caused down-regulation of WWOX protein. Based on the data from other researchers and our unpublished data, we hypothesize that WWOX is closely related to resistance to breast cancer endocrine therapy because it is involved in regulation of transcript activity of estrogen receptor (ER) and may serve as the upstream regulator of ER. Cellular and molecular techniques will be used to address the role of WWOX in regulation of ER transcript activity and resistance to endocrine therapy for breast cancer. Our research data are expected to provide a novel strategy and molecular target for breast cancer endocrine therapy.

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，而内分泌治疗已经成为其术后辅助和晚期姑息治疗的重要选择，但是内分泌治疗耐药却成为内分泌治疗面临的棘手问题。脆性位点基因WWOX调节类固醇激素生成并与乳腺癌雌激素受体（ER）关系密切。我们前期研究发现WWOX在内分泌治疗耐药细胞系及组织中表达明显下降，并且在耐药细胞系中过表达WWOX会造成其耐药性显著下降，此外内分泌治疗药物他莫西芬和依西美坦均能引起WWOX蛋白表达下调。根据文献报道及我们前期研究结果，我们提出：脆性位点基因WWOX可能是ER信号通路的上游调节因子,通过调控 ER信号通路抑制乳腺癌内分泌治疗耐药。我们拟利用前期积累的内分泌治疗耐药标本及细胞系，采用细胞分子生物学技术研究WWOX对ER信号通路的调节功能，从而阐明WWOX在乳腺癌内分泌治疗耐药中的作用，为乳腺癌的综合治疗提供新的治疗策略及靶点。

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其病因复杂且临床疗效较差，而内分泌治疗是雌激素受体阳性乳腺癌的主要治疗方法，其中他莫昔芬是内分泌治疗中应用最为广泛的药物，但是五年用药时间已经成为他莫昔芬治疗中的挑战，由于药物耐药性的增加，延长治疗时间已经不能够增加治疗效果。因此研究乳腺癌的内分泌耐药机制具有十分重要的意义。本研究证明在乳腺癌耐药组织及细胞中，脆性位点基因WWOX的表达显著下调，而且在他莫昔芬敏感细胞中下调WWOX的表达显著增加细胞耐药性。同时我们首次发现下调WWOX能够降低YAP的磷酸化水平并且促进其入核激活Hippo信号通路下游蛋白的转录，而在WWOX敲低的细胞中下调YAP能够显著逆转他莫昔芬耐药。另一方面，我们的研究发现敲低WWOX能够增加乳腺癌细胞的干样特性，同时诱导细胞的上皮-间皮转化和化疗药物耐药性。我们的研究揭示了WWOX在乳腺癌他莫昔芬耐药和化疗药物耐药中的调节作用。因此，WWOX可能是乳腺癌药物耐药的重要治疗靶点和预后标志物。. 在研究中我们还发现许多细胞极性蛋白都能够调节细胞干性，而干性增加是导致细胞耐药性增加的重要机制，因此我们利用乳腺癌他莫昔芬耐药细胞系筛选出细胞极性蛋白DLG5和LKB1，并且研究其调节乳腺癌内分泌耐药的具体机制。研究表明DLG5能够抑制TAZ表达促进细胞干性增加最终导致他莫昔芬耐药。而在LuminalA/B亚型的乳腺癌中，LKB1的低表达是一种不良预后的指标，并且该蛋白从细胞质象细胞核的移行与乳腺癌他莫昔芬耐药密切相关。上述实验结果拓展了本研究内容，丰富了乳腺癌内分泌耐药的调节机制，为乳腺癌内分泌耐药提供了新的治疗靶点。