蛋白质末端氨基转氨化反应的研究

多肽或蛋白质末端氨基醛基化试剂吡哆醛(PLP)的发现为多肽或蛋白质N端的选择性修饰提供了一种高效的方法，并可以应用于生物体系。我们拟合成一系列吡哆醛的衍生物以提高其对蛋白质或多肽N端氨基转氨化反应的效率，并进一步优化反应条件使其具有更好的生物相容性。具体计划为(1)设计和合成一系列PLP衍生物，为提高多肽/蛋白质末端氨基转氨化效率提供新的试剂，为多肽/蛋白质的PEG修饰提供高效且温和的化学基础；(2)采用固相方法合成多肽模型分子，检测新合成的PLP衍生物相对于PLP对多肽末端氨基醛基化的反应速率及产率，筛选出新一代的在蛋白质PEG修饰过程中，能够更为有效地促进蛋白质末端不同类型氨基酸酮酸化的衍生物结构和酮酸化反应条件；(3) 利用筛选得到的PLP衍生物选择性地对药用蛋白人干扰素α-2b的N端氨基进行醛基化以及PEG修饰，并进一步优化反应条件使其具有更好的生物相容性。

蛋白质进行选择性人工修饰在研究蛋白质表达，调节蛋白质的功能以及研究蛋白质结构功能关系等方面具有重要的价值。而蛋白质的N端和C端，由于其独特的末端位置，它们的位点特异性修饰具有许多优势。本项目主要发展了C端和N端修饰的新方法。具体成果为，（一）发展新的吡哆醛(PLP)衍生物FHMDP，高效地实现了N端多肽（包括大位阻氨基酸Leu, Ile, Val)的转氨化反应。（二）修饰C端,发展了Fmoc合成多肽芳基硫酯的新方法。