SPAG9调控JNK/AP-1对子宫内膜癌细胞上皮-间质转化的潜在作用

Endometrial cancer accounts for 20-30% of total female genital tract malignant tumors. We previously found SPAG9(sperm associated antigen 9) to be highly expressed in endometrial carcinoma. SPAG9 which is involved in tumor invasion and the regulation of JNK pathway is predicted to be associated with tumor epithelial-mesenchymal transition. In this study we try to investigate the potential role of SPAG9 in the epithelial-mesenchymal transition of endometrial carcinoma through loss-of-function and gain-of-function study and whether or not this is JNK dependent.We will investigate the expression of SPAG9/JNK/AP-1 in endometrial carcinoma tissues.We will construct a eukaryotic expression vector(pcDNA3.1-spag9),a SiRNA vector(SPAG9ShRNA) and control vectors and stably transfect them into endometrial cell lines with or without the treatment of a JNK inhibitor. Cellular shape, growth, migration, invasion, and gene expressions related to epithelial-mesenchymal transition will be studied in vitro.Furthermore, a xenograft model in nude mice will be established to investigate whether SPAG9 promotes epithelial-mesenchymal transition of endometrial carcinoma cells through targeting JNK/AP-1 pathway. This study will help to understand the significance of SPAG9 over-expression for endometrial carcinoma cell proliferation and metastasis and also help to discover new promising therapeutic approach for the treatment of endometrial carcinoma.

子宫内膜癌(EnCa)占女性生殖道恶性肿瘤的20％-30％。课题组前期研究发现SPAG9（精子相关抗原9）在EnCa异常高表达，因SPAG9参与肿瘤侵袭和JNK通路调节，推测其可能与EnCa上皮-间质转化有关。本课题拟通过使EnCa细胞SPAG9过表达或降表达，研究其对EnCa上皮-间质转化的潜在作用，并研究该作用是否为JNK依赖：临床标本中检测SPAG9/JNK/AP-1表达；构建表达载体pcDNA3.1-spag9、干扰载体SPAG9ShRNA、对照质粒稳定转染EnCa细胞，以JNK抑制剂干预，研究EnCa细胞上皮-间质转化的相关细胞形态、分子标志及侵袭力改变；将上述细胞系配对注射裸鼠皮下，建立动物模型，体内验证。研究SPAG9/JNK/AP-1在子宫内膜癌上皮-间质转化中的作用有助于了解SPAG9高表达对EnCa细胞自身生长及转移的意义，有助于发现新的治疗靶点。

子宫内膜癌（EnCa）是女性生殖道三大恶性肿瘤之一，占女性恶性肿瘤总数的7%，但EnCa的具体发病机制尚不十分明确。本课题拟通过临床组织标本，体外细胞培养方面，系统研究SPAG9在子宫内膜癌发生发展中的作用，以及SPAG9对子宫内膜癌EMT的作用和调节机制，此外研究SPAG9与孕激素治疗复杂性非典型子宫内膜增生（CAEH）和1级子宫内膜样腺癌（EA）疗效之间的关系。并进一步探讨SPAG9在宫颈癌和上皮内瘤变中的表达和意义及其临床应用价值。经研究证实，SPAG9的表达可能影响子宫内膜癌组织上皮-间质转化相关基因的转录调节；SPAG9可以促进子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭和迁移。TGF-β1 治疗和球体形成可以促进SPAG9的表达，同时可以促进EMT的转化，而这种调节机制可能与TGF-β1 治疗和球体形成有关，具体机制尚需进一步研究。此外，SPAG9可能与CAEH和1级EA孕激素治疗的疗效有关。它可能有助于区分CAEH和1级EA，并作为CAEH或1级EA孕激素治疗的新的预后标记。SPAG9蛋白在宫颈腺癌组织中存在高表达，在宫颈癌和CIN 组织以及患者血清中表达量均增高，其作为一个新的辅助生物学指标，可为宫颈癌及CIN 的早期诊断、术后检测及随诊治疗提供指导意义。该研究将为子宫内膜癌及宫颈癌发生发展机制提供新的思路，为疾病诊断、评估提供新的标记物，并为该疾病的治疗提供新的靶点。