家鸡新型似催乳素(PRL2)基因的表达与功能研究

催乳素(Prolactin, PRL)长久以来被认为主由脊椎动物垂体产生，以内分泌方式参与众多重要生理过程。最近，我们首次从家鸡及斑马鱼脑中鉴定到一种新型似催乳素基因（命名为：Prolactin 2，PRL2），RT-PCR检测到该基因在家鸡早期胚胎组织, 成体家鸡非垂体组织中表达， 暗示其可作为催乳素受体另一配体，并以"旁分泌/自分泌"方式影响众多生理过程。为验证该假说，作者拟用原位杂交﹑Real-time PCR﹑免疫组化﹑ELISA﹑Western blot等方法系统研究：1) PRL2可否作为催乳素受体的配体；2）PRL2基因在家鸡发育胚胎﹑生长及繁育各阶段组织中的时空表达图谱；3）PRL2在发育家鸡卵巢中的表达调控机制及其潜在生理作用。这些研究结果将为验证"在非哺乳类脊椎动物中，两种催乳素基因同时存在，且以不同方式作用于靶组织" 这一全新理论假设提供来自家鸡的实验证据。

催乳素(Prolactin, PRL)长久以来被认为主由脊椎动物垂体产生，以内分泌方式参与众多重要生理过程。我们首次从家鸡及斑马鱼脑中鉴定到一种新型似催乳素基因（Prolactin 2, PRL2，又称为PRL-L），RT-PCR检测该基因在家鸡早期胚胎组织, 成体家鸡非垂体组织中表达， 暗示其可作为催乳素受体另一配体，并以"旁分泌/自分泌"方式影响众多生理过程。为验证该假说，本项目在基金支持下利用多种实验方法研究并发现：1）家鸡非垂体组织来源的PRL2和垂体来源的PRL均可作为催乳素受体的功能性配体，且两者均可通过与PRLR的膜近端配体结合域结合来激活受体。但PRL2对PRLR的亲和力远较PRL低。 2）PRL高表于胚胎期、生长期、成体期家鸡的多种组织包括卵巢中。但其在卵巢中的表达似乎不受垂体来源FSH和LH及卵巢自身产生的激素调节。 3）在家鸡慢羽品系中，鉴定到一个新催乳素受体(duplicated Prolactin Receptor: dPRLR)基因。 在体外，它可被PRL及PRL2激活，从而激活胞内JAK2-STAT5信号通路。结合PRL 与PRL2及两个催乳素受体基因在家鸡皮肤中高表达，暗示：皮肤来源的PRL， PRL2及垂体来源PRL，作用共同催乳素受体，进而协同控制羽毛发育。这些结果为"两种催乳素以协同或互补方式作用于靶组织" 这一理论提供证据，亦为阐释PRL2、 PRL及其受体对家鸡经济性状（产蛋、抱巢、羽毛发育等）的控制奠定基础。