藏药雪灵芝肿瘤抑制与免疫激活协同效应及机制的体内外研究

藏药雪灵芝，为青藏高原特有的石竹科蚤缀(Arenaria)属草本植物，含有多糖、三萜皂苷、β-咔波啉生物碱及环肽等潜在抗肿瘤活性物质。据有关研究，雪灵芝不仅毒性小、具有免疫调节和肝脏保护作用，并可预防二乙基亚硝胺诱发的大鼠肝癌。本申请人前期研究显示，在一定剂量范围内，雪灵芝可增强特异性免疫反应，对体外培养的人胃癌细胞株和人肝癌细胞株具有明显的增殖抑制效应，而不影响正常组织细胞的增殖。本项目拟采用细胞分子水平的体外研究和荷瘤鼠模型的体内研究，通过观察雪灵芝提取物对体外培养的肿瘤细胞、正常组织细胞增殖以及特异性免疫细胞活化的影响，进而观察细胞周期、凋亡相关分子及Th1型细胞因子表达水平的变化，以期从细胞分子水平和荷瘤鼠体内水平，证实雪灵芝具有抑制肿瘤细胞增殖和促进免疫细胞活化的双重抗肿瘤效应，并探索其量效关系和分子机制，为进一步开展雪灵芝抗肿瘤活性成分研究提供理论依据和实验基础。

雪灵芝为青藏高原生长的蚤缀属草本植物，含有多糖、生物碱及环肽等潜在抗肿瘤活性物质。为观察藏药雪灵芝是否具有抑制肿瘤细胞增殖及促进淋巴细胞活化的双重抗肿瘤效应，本项目采用细胞生物学、分子生物学及动物实验的方法，通过体内、体外两种研究途径，进行了以下三方面的研究：① 雪灵芝水提物对体外培养的肿瘤细胞、免疫细胞及正常组织细胞增殖或活化的影响；② 雪灵芝水提物体外抑制肿瘤增殖与免疫激活的分子机制；③雪灵芝水提物对H22荷瘤小鼠肿瘤抑制与免疫激活作用。结果显示，雪灵芝水提物对体外培养的MGC-803、Hep-G2等肿瘤细胞具有不同程度的增殖抑制作用，而对正常组织来源的HL-7702细胞、大鼠骨髓MSC及免疫细胞增殖不仅无抑制作用，而且有促进作用；雪灵芝水提物对人胃癌细胞MGC-803中cyclin D1 、p16和p21 等G1期调节因子表达具有影响；雪灵芝水提物对体外培养小鼠脾淋巴细胞、人外周血单个核细胞中NF-κB p65蛋白及Th1型细胞因子（IL-2、IFN-γ）表达水平具有促进作用；雪灵芝水提物对H22荷瘤小鼠具有延长生存时间、增加进食量与体重、抑制肿瘤生长的作用，而且对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫具有激活作用。