脐带间充质干细胞通过PGE2调控类风湿关节炎Tfh增殖分化及机制的研究

Follicular helper T cells (Tfh) are a recently found CD4+T cell subset that can help B cells activation, which may play an important role in rheumatoid arthritis(RA).Umbilical cord mesenchymal stem cells(UC-MSCs) have immunue regulatory function on T cells via prostaglandin E2 (PGE2) released by UC-MSCs.Our previous data showed that peripheral Tfh percentage was increased in RA and UC-MSCs could downregulate Tfh percentage. Additionally, there were elevated PGE2 levels in coculture system of UC-MSCs and CD4+T cells, and the immune inhibitory effect of UC-MSCs on Tfh was obviously impaired in the presence of anti-PGE2 antibody, suggesting that the immune suppressive effect of UC-MSCs on Tfh might be mediated by PGE2.Based on our previous work，in the present study，we will investigate the effects of UC-MSCs on Tfh proliferaion，differentiation and apoptosis，and explore the role and mechanism of UC-MSCs in regulating Tfh via PGE2. In addition, the cytokines and signal pathways which upregulate PGE2 expression will be analyzed.This study will uncover the cellular and molecular mechanisms of UC-MSCs in regulating Tfh proliferation and differentiation,and provide an effective target for clinical immune therapy of RA.

新近发现的滤泡辅助T细胞(Tfh)是促进B细胞活化最主要的CD4+T辅助细胞，在类风湿关节炎(RA)发病中可能有重要作用。脐带间充质干细胞(UC-MSCs)可通过释放的可溶性因子介导免疫调节功能。我们前期研究发现，RA患者外周血Tfh比例升高，而UC-MSCs能下调RA患者活化CD4+T细胞中Tfh比例；此外，在 UC-MSCs和活化CD4+T细胞共培养体系中PGE2水平增高，加入抗PGE2抗体后， UC-MSCs对Tfh的免疫抑制作用明显减弱。推测，UC-MSCs对Tfh抑制作用是由PGE2所介导。在前期基础上，本课题将进一步研究UC-MSCs对Tfh增殖、分化和凋亡的影响，重点探讨UC-MSCs释放PGE2对Tfh的调控作用及其机制，同时分析诱导UC-MSCs释放PGE2的细胞因子及其信号通路。通过上述研究，揭示UC-MSCs调控Tfh的细胞和分子水平机制,为RA免疫治疗提供线索。

滤泡辅助T细胞（T follicular helper cell，Tfh）是新近发现的一种CD4+辅助性T细胞亚群，通过表达ICOS、CD40L、PD-1等免疫分子辅助B细胞产生抗体参与体液免疫。间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)来源于中胚层，具有自我更新和多向分化功能。近年来发现，MSC具有强大的免疫调控作用，能抑制T细胞、B细胞以及树突状细胞的增殖和活化，用于治疗多种自身免疫病。在本课题中，我们在体外试验发现脐带MSC通过释放IDO抑制类风湿关节炎（rheumatoid arhtiritis，RA）和原发性干燥综合征（sjogren syndrom，pSS）患者外周血Tfh细胞的分化；动物实验进一步验证MSC移植能改善RA动物模型胶原诱导关节炎（collagen-induced arthritis， CIA）鼠的炎症程度，并抑制CIA小鼠Tfh细胞数量和功能。 .细胞因子，滑膜成纤维细胞（fibroblast-like synoviacytes，FLS）以及CD4+T淋巴细胞相互作用参与RA发病。在本研究中，我们显示，1. 活化的FLS通过释放IL-6上调RA外周CD4+CXCR5+ICOS+ T细胞；2. 细胞因子TL1A和IL-34刺激的FLS能释放IL-6，进而增加Th17比例；3. IL-34活化的单核细胞亦可通过分泌IL-6促进Th17产生；4. IL-34与其受体结合刺激FLS分泌PGE2。在本项目执行过程中，已发表相关的SCI文章8篇；国内核心期刊文章3篇，综述1篇。通过上述研究，为细胞因子、CD4+T淋巴细胞和FLS在RA发病中的作用以及MSC治疗RA提供理论和实验依据。