免疫调节性T细胞对肥胖小鼠巨噬细胞的作用及机制研究

M2型巨噬细胞在肥胖过程中可被活化为M1型巨噬细胞，继而介导炎症和胰岛素抵抗。PPARγ对于调控M1和M2两种巨噬细胞的转化至关重要，在一定程度上决定着肥胖的预后。新近研究发现，免疫调节紊乱在肥胖致病中发挥关键作用，免疫调节性T（Treg）细胞功能缺陷可能是肥胖自然病程中的早期事件，但Treg细胞的功能变化如何调节巨噬细胞内PPARγ的活性尚不清楚。因此，本研究：（1）拟通过系统动态的观察，阐明Treg细胞的变化是否是肥胖自然病程中的早期事件；以及Treg细胞的变化与巨噬细胞PPARγ活性和M1和M2型巨噬细胞转化之间的关联性；（2）通过CD25单抗封闭和RNA干扰FOXP3从蛋白质和mRNA两个水平阻断Treg细胞，以及过继转移Treg细胞试验等，探讨Treg细胞对巨噬细胞PPARγ活性的影响及机制，同时用体外实验加以验证。这将揭示免疫参与肥胖致病的作用及机制，为肥胖的防治提供新途径。

本课题在前期工作的基础上，从肥胖的自然病程和自身免疫两个崭新的角度去观察肥胖早期发生过程中Treg细胞的数量和功能变化、及其与脂肪组织浸润巨噬细胞的不同类型之间的关系，同时探讨Treg细胞调节巨噬细胞浸润。1）成功建成早期肥胖的模型，即动物处于内脏脂肪重量增加，以及肝脏有脂肪浸润，但尚未发生糖尿病以及胰岛素抵抗的早期阶段。2）发现高脂饮食组，喂养至10周龄，小鼠体内Treg数目下降（ 4.93% VS 6.40%，n=5，P<0.05）,且一直持续至20周龄（4.73%）。发生早期肥胖的小鼠在10周以及20周伴有脂肪组织内巨噬细胞的浸润。3）高糖饮食组在体重、附睾旁脂肪重量和血清瘦素水平等方面均与正常饮食组无差别。real-time PCR结果显示，脂肪组织MCP-1和iNOS mRNA的表达在高脂饮食组显著上调，而高糖饮食组与正常对照组无显著性差异。4）以雷帕霉素刺激后，增加Treg数量可以改善肥胖，调节巨噬细胞从M1向M2转换，提示treg细胞数量减少是肥胖的早期事件，自身免疫与天然免疫之间存在密切关系。