CTA高效低毒性免疫抑制和供体特异性免疫耐受联合治疗方案的实验研究

尽管内脏器官异体移植已获得广泛临床应用,异体复合组织移植(composite tissue allotranplantation,CTA)的推广仍存在明显障碍-对术前基本健康的患者进行术后长期的免疫抑制治疗很难将副作用降至轻微且费用昂贵.本课题提出的应对方案有:①中西医联合用药,制定高效低毒的免疫抑制方案.验证中药雷公藤中活性单体成分雷公藤内酯醇(PG490)在CTA应用的有效性及摸索与环孢霉素的最佳联合用药方案,在减少单药用量的同时增强效用;②探索CTA同时联合带血供骨髓移植能否产生供体特异性的免疫耐受.比较4种皮肤软组织+骨(髓)移植的CTA模型,评测何者可以诱导产生较高的,稳定的嵌合状态及对移植的皮肤软组织成活的影响.在这2方面结果基础上,将免疫抑制与免疫耐受相结合探讨一个比较理想的CTA抗免疫排斥方案:只需短时小剂量给药,移植物即能很好地存活并发挥功能,而受体维持基本健康的状态

各种原因所引起的广泛及复杂的组织缺损和畸形，（如面部及肢体）的修复与重建往往十分棘手，这些部位的组织结构精细，传统的修复方法难以重建和恢复患者的外观及功能。同种异体复合组织(CTA)可以在修复组织缺损的同时，最大程度的重建患者的功能，恢复外观，显然是最为理想的选择。但目前阻碍其临床广泛应用的是移植后的免疫排斥反应问题，中药雷公藤主要活性成份为PG490，其在同种异体复合组织移植中的作用尚不清楚，本研究探讨了PG490在同种异体复合组织移中的免疫抑制及诱导嵌合体形成中的作用。.在第一部分，我们建立游离腹部皮瓣移植模型，并将受体随机分为4组，予以不同的处理。分别检测术后皮瓣存活时间、皮瓣的免疫排斥反应分级、调节T细胞的变化以及树突状细胞成熟相关因子的改变。第二部分：以第二部分建立的CTA模型，分别予以不同剂量的FK506及PG490治疗移植后的排斥反应，观察移植物的存活时间、皮肤排斥的病理分级、T淋巴细胞抑制、受体外周炎症因子含量、受体外周血嵌合率、移植后肢骨髓细胞的凋亡以及其凋亡相关基因bcl-2和Bax的mRNA的表达。.实验结果表明：PG490联合CsA治疗同种异体游离皮瓣移植，可以明显延长皮瓣存活时间，降低免疫排斥反应，这可能与PG490可以提高受体脾脏调节性T细胞的比例，并且抑制树突状细胞成熟相关因子的表达相关。我们在第二部分成功建立了一种新的全后肢异位同种异体复合组织移植模型，该模型具有操作简单、创伤小、并发症低等优点，且免疫排斥反应过程稳定，移植物为受体接受后，可形成一定水平的嵌合率。PG490可以降低FK506的使用剂量，降低免疫抑制药物的副反应，减轻免疫排斥反应。同时，PG490可以降低受体外周血炎症因子的含量、协同抑制T细胞的活化与增殖。另外PG490可能通过调节凋亡相关基因bcl-2和Bax的表达，抑制移植后肢骨髓细胞的凋亡，从而提高受体外周嵌合水平。.由此可见，PG490可以作为CTA后抗免疫排斥反应的辅助用药，降低传统免疫抑制剂的剂量，降低副反应，对于带骨髓的肢体移植，加用PG490还可以提高受体嵌合率，这可能有助于移植物的存活及免疫耐受的诱导。