前期工作中, 我们通过抑制消减杂交方法联合马拉松全长cDNA扩增技术(RACE- PCR),筛选到在缺血后处理的大鼠骨骼肌中表达明显增高的新基因PostC1(基因登录号:AM231712)。本项目中,我们拟建立稳定表达或"敲除"PostC1基因的骨骼肌细胞株,探讨"过表达"或"沉默"PostC1基因对缺血/再灌注过程中骨骼肌细胞凋亡或坏死等功能的影响;cDNA芯片初步筛选PostC1可能调控的下游基因,并采用生物信息学分析、Northern blot或Western blot等方法加以验证;GST融合蛋白pull-down技术和免疫共沉淀方法检测可能与PostC1相互作用的蛋白质,初步研究蛋白相互作用的结合位点。探讨PostC1骨骼肌内源性保护作用的分子机制,为缺血/再灌注损伤性疾病的防治提供新的线索和思路。
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数据更新时间:2023-05-31
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