光敏控制的构象锁定寡肽作为信号转导研究探针

Verdine等发展的构象锁定寡肽（stapled peptides）是调控蛋白/蛋白相互作用的先进技术。本项目拟将该技术与光控基团创造性地联合起来，发展新型光敏控制的、同时构象又锁定的寡肽作为化学分子探针，用于调控体内蛋白/蛋白相互作用。具体计划为：一、发展新方法锁定寡肽构象。探索点击化学、酮酸与羟胺偶联反应在锁定α螺旋构象中的应用，并与烯烃复分解方法进行比较，从中选择最优的构象锁定方法。通过测定寡肽的构象、穿过细胞膜的能力、与目标蛋白的结合能力等实验，以及与前人的结果进行比较，以判断新方法的有效性。二、在构象锁定寡肽上安置光敏基团，拟对引入光敏基团的个数及其位置进行研究，从而得到时间和空间分辨的构象锁定寡肽，实现锁定α螺旋构象寡肽的可控释放。三、使用合成出的新型构象锁定寡肽，在细胞内完成对于Notch信号和细胞凋亡信号的精确调控，以探索新探针在信号转导研究中的新颖而独特价值。

Verdine 等发展的构象锁定寡肽（stapled peptides）是调控蛋白/蛋白相互作用的先进技术。本项目将该技术与光控基团创造性地联合起来，发展新型光敏控制的、同时构象又锁定的寡肽作为化学分子探针，用于调控体内蛋白/蛋白相互作用。具体成果为：一、发展新方法锁定寡肽构象。探索了蛋白酰肼连接反应及二氨基二酸策略在锁定构象中的应用。通过测定寡肽的构象、穿过细胞膜的能力、与目标蛋白的结合能力等实验，以及与前人的结果进行比较，以判断新方法的有效性。二、使用构象锁定寡肽可以实现对WNT信号通路进行特异性的上调。此外，我们证实设计的构象锁定寡肽还可以有效的维持小鼠胚胎干细胞的再分化能力。这一构象锁定寡肽的发现有希望在生命科学研究以及治疗Wnt缺失相关疾病得到广泛应用。三、使用合成出的新型构象锁定寡肽对HCV进入宿主细胞过程进行干扰。发现了可以高效抑制HCV进入细胞的入膜抑制剂，该抑制剂具有成为HCV入膜抑制剂的潜力。