SCP1去磷酸化PIPKIγ90调控细胞迁移的机制与功能研究

细胞迁移在生理及病理活动中发挥着重要的作用。I型磷脂酰肌醇磷酸激酶PIPKIγ90是近年发现的调控细胞迁移的重要蛋白，文献及申请人的前期工作表明PIPKIγ90在肿瘤细胞及白细胞的定向迁移中发挥重要的作用。已知磷酸化修饰对于PIPKIγ90的生物功能起着关键的调节作用，但是，PIPKIγ90的去磷酸化机制并不清楚。申请者通过功能基因筛选发现磷酸酶SCP/FCP家族的SCP1、2、3能特异地对PIPKIγ90的650位丝氨酸去磷酸化，而且SCP1能与PIPKIγ90在细胞内相互作用并能共定位。本课题拟在已有的工作基础之上进一步研究SCP磷酸酶家族对PIPKIγ90的去磷酸化调控机制，并以肿瘤细胞及白细胞为模型，深入探讨SCP1对PIPKIγ90的生物功能包括细胞粘附、迁移及相关疾病包括肿瘤转移及炎症反应等的调控作用。本课题对于发现调控细胞迁移的新机制以及开发相关疾病的新靶点都具有重要意义。

在本项目的实施过程中，我们通过筛选发现SCP1 能够与PIP5K1c结合，并对PIP5K1c发生去磷酸化修饰。我们对去磷酸化位点进行了确定。另外，我们发现SCP1能够特异的与PIP5K1c相互作用，我们确定了结合位点。文献报道SCP1是一个细胞核定位蛋白，但在我们的研究过程中，我们发现SCP1定位于细胞膜，我们对SCP1的细胞膜定位机制进行了详细研究，我们发现在SCP1的N端有一个棕榈酰化位点。进一步的生化及细胞生物学实验证明SCP1确实能发生棕榈酰化修饰。另外，我们发现SCP1 能够负调控细胞迁移及细胞增殖。总体上项目实施顺利，而且在项目的实施过程中，有许多新的发现，为将来的进一步研究奠定了良好基础。