柚单染色体AFLP分子标记体系及文库的构建

柚是我国重要的水果。.本项目采用成熟的染色体微分离和微克隆技术，以琯溪蜜柚幼胚为材料，通过显微操作仪挑取单染色体；经过蛋白酶处理、Sau3A酶解、加接头，采用LA-PCR方法进行单染色体体外扩增；通过Southern杂交和对照实验，鉴定扩增产物来源；采用AFLP技术，建立稳定可靠的单染色体分子标记体系；并以此分子标记区别同源染色体和非同源染色体；最后，将具有同源染色体特异分子标记特征的文库进行合并，建立柚覆盖率高的单染色体文库。.为今后建立精确的柚物理图谱打好基础，对于进一步进行柚基因组学的研究具有重要的理论和现实意义。同时为分子育种以及进行基因的定位与分离提供更加准确、快捷、方便的方法。