甲基化修饰介导的miR-124表达沉默对人胰腺癌细胞生物表型影响与机制分析

胰腺癌预后差，探索胰腺癌新的发病机制、寻找新的治疗靶点将具有重要临床价值。课题组前期研究发现，胰腺癌细胞中存在miR-124表达下调，与其编码DNA发生甲基化修饰相关，推测在胰腺癌中miR-124可能发生甲基化修饰而表达沉默，进而参与肿瘤发生发展。本研究拟通过qRT-PCR技术及甲基化特异性PCR技术对人胰腺癌细胞miR-124表达水平及其DNA甲基化状态进行检测，评价胰腺癌中DNA甲基化修饰对miR-124表达的沉默效应。同时通过体内、外功能学研究评价miR-124表达沉默对人胰腺癌细胞增殖、侵袭、转移等生物学行为的影响及其下游靶基因调控变化。并通过观察人胰腺癌组织miR-124表达水平、甲基化状态与患者生存期相关性，评价其在人胰腺癌预后预测中的价值。以期明确在胰腺癌中表观遗传修饰所介导的microRNA自身相关表达调控对胰腺癌细胞的影响，为寻找胰腺癌新的预后标记及新的治疗靶点提供依据。

既往研究提示肿瘤组织miRNA表达异常，其机制尚不清楚。本研究中，我们研究了胰腺癌中miR-124表观遗传修饰及其对胰腺癌细胞生物学行为的影响。我们发现胰腺癌组织miR-124基因启动子存在高甲基化导致表达下调，miR-124表达及其DNA甲基化水平与胰腺癌患者预后相关。miR-124可在体外、体内抑制胰腺癌细胞增殖、运动、侵袭和转移。Rac1为miR-124直接调控靶基因，其介导了miR-124对胰腺癌细胞侵袭、转移的作用，该作用主要是通过调控Rac1及后续MKK4-JNK-c-Jun通路发挥作用。因此，我们的研究提示胰腺癌中miR-124为一抑癌性miRNA，其因甲基化修改而表达异常，进而参与了胰腺癌细胞侵袭转移。