非MHC限制性γδT细胞激活在慢性HBV感染中的作用研究

HBV感染慢性化的直接原因为HBV特异性T细胞免疫耐受，而非病毒特异性细胞(NK、DC等)的功能异常是导致特异性T细胞耐受的重要因素。γδT细胞作为一种重要的非特异性免疫细胞，其与慢性HBV感染的关系还鲜见报道。我们前期研究显示，慢性HBV感染者外周血Vδ2T细胞(γδT亚型)比例较低且与ALT/AST水平呈负相关，因此推测其可能在慢性HBV感染中激活并起一定作用。.基于此，本研究将深入探讨慢性HBV感染者外周血或肝组织内γδT细胞的激活表型，分析与HBV复制及肝细胞炎症的相关性；观察γδT细胞受病毒成分或肝细胞成分刺激后的功能，分析其在慢性HBV感染过程中对肝细胞产生的可能免疫损伤作用；观测激活后的γδT细胞对HBV特异性T细胞的作用，探讨与HBV特异性T细胞免疫耐受的关系。最终试图阐明γδT细胞在HBV感染慢性化过程中的可能作用与机制，为更全面反映慢性HBV感染的免疫机制提供实验依据。

γδT细胞作为一种重要的非特异性免疫细胞，其在慢性HBV感染中的作用还鲜见报道。本研究深入探讨了慢性HBV感染进程中外周血γδT细胞的免疫表型及功能，分析与HBV复制及肝细胞炎症的相关性；并观察了γδT细胞对其它T细胞的作用，探讨与HBV特异性T细胞免疫耐受的关系。.首先检测了慢性HBV感染（CHBV）患者、HBV相关的慢加急性肝衰竭（HBV-ACLF）患者外周血中γδT细胞比例、亚型及细胞因子分泌等免疫功能。结果提示，CHBV组Vδ1T的比例显著高于HC组；HBV-ACLF患者γδT细胞比例低于CHBV患者与健康对照者（HC），而Vδ1T的比例显著高于HC组，Vδ2T比例低于HC组；同时IFN-γ+γδT细胞在CHBV组或HBV-ACLF组的比例均高于HC组，HBV-ACLF组的TNF-α+γδT或IL-17+γδT细胞高于CHBV患者及HC组；HBV-ACLF组中TNF-α+ γδ T 细胞的比例与ALT或AST水平呈负相关，而与HBV-DNA水平不相关。结果提示，CHBV患者的γδ T细胞存在多种免疫学特性的改变；HBV-ACLF患者的γδ T细胞产生炎性细胞因子或细胞毒相关潜能显著增强，可能参与了HBV-ACLF发病过程中炎症因子急剧升高或肝细胞损伤的过程。.继而，在体外分析了γδT细胞与CD4+T或CD8+T细胞相互作用后的免疫表型及功能，探讨γδT细胞是否对HBV特异性T细胞有一定的免疫调节作用。结果显示，HBV-ACLF患者的γδT细胞与CD4+T细胞作用后，可使CD4+T激活或记忆表型（CD27、CD45RO等）表达降低、CD4+T分泌IFN-γ或TNF-α增加、γδT的 IFN-γ分泌增加。但目前的结果并未显示γδT与CD8+T细胞作用后对HBcAg特异性CD8+T细胞比例的影响。结果提示，γδT细胞可能对CD4+T细胞有一定的免疫调节作用。.同时，我们还观察了CHBV患者干扰素治疗过程中γδ T细胞免疫表型及功能的动态变化。结果显示，在peg干扰素治疗过程中，γδT及Vδ2T比例总趋势为下降，其表型及功能也随着治疗过程而不断变化。. 研究结果显示了在慢性HBV感染过程中，γδT细胞可能处于一种免疫功能激活的状态；推测γδT细胞与慢性HBV感染中肝细胞的炎性损伤存在某种联系。为阐明γδT细胞在HBV感染慢性化过程中的可能作用与机制提供了依据。