T细胞Sema4D表达在HBV慢性持续感染中的作用机制研究

T cell immunity plays a pivotal role in the viral control and clearance in viral hepatitis B infection. HBV infection resulted in T cell dysfunction, impaired T cell response hindered inhibition of HBV replication by host immune response, while the exact mechanism remained unclear. Sema4D which was the first immune semaphonrin discovered played important immune regulatory functions in the mutual activations of T cell and B cell. To date, accumulating evidences have indicated that expressions of Sema4D on T cells were decreased or lost during chronic viral infection. Our preliminary study had found significantly lower level of Sema4D on T cells in patients with chronic hepatitis B infection than in patients with acute hepatitis B infection and in healthy blood donors, which suggested that Sema4D may be a contributory factor in T cell dysfunction in chronic HBV infection. The current study is designed to recruit different stages of HBV-infected subjects and evaluate the expression levels of Sema4D in HBV infection and analyze the correlations among Sema4D expression and corresponding virological and immulogical parameters, and investigate the effects of Sema4D on T cell response and cytokine secretion. Elucidation of the role of Sema4D in T cell response will reveal the mechanism of T cell dysfunction in HBV infection and provide an effective immune strategy for modulating antiviral immunity and treating chronic viral infection.

T细胞免疫在控制和清除HBV感染中发挥关键作用，但是HBV感染导致T细胞功能低下，严重阻碍了机体免疫应答对HBV复制的抑制，其具体机制尚不清楚。Sema4D是近年新发现的免疫调节分子，在免疫系统中T、B细胞的活化和免疫调节中发挥重要作用。研究表明，慢性病毒感染中病毒特异性T细胞的应答低下和Sema4D的表达下调或缺失相关。我们初步研究发现，慢性HBV感染者PBMC中表达Sema4D的T细胞比例较急性HBV感染者和健康对照者显著降低，提示Sema4D可能与HBV感染T细胞功能低下相关。本项目拟进一步研究急、慢性HBV感染者体内不同T细胞亚群Sema4D的表达及其与相应病毒学、免疫学指标的关联，探讨Sema4D表达对T细胞免疫活性的调节作用及对相关细胞因子分泌的影响，揭示Sema4D在HBV感染T细胞应答中的作用，为阐明HBV慢性持续感染分子机制提供实验依据，为抗HBV治疗提供新的思路和靶点。

HBV感染慢性化的机制尚未完全阐明，严重阻碍了有效治疗措施的研究和制定。近年来关于HBV致病机制的研究突飞猛进，人们对HBV感染免疫提出了很多重要见解，其中HBV导致肝脏损伤主要是由机体免疫系统介导，并依赖于病毒的不断复制，而病毒特异性细胞在控制和清除病毒中的特殊作用，HBV特异性T细胞数量的多少及功能的强弱均决定着HBV感染的预后。最新研究证明，Sema4D对维持病毒特异性T细胞的功能发挥重要作用。Sema4D可增强HIV感染过程中CD8+T细胞应答，在CD8+T细胞控制感染慢性化中发挥关键作用。课题目前已经完成了HBV感染者的选择、分类及病毒学、免疫学状态的评价；HBV感染者外周血病毒特异性T细胞中Sema4D表达水平的检测；Sema4D在HBV急性感染和慢性感染过程中的纵向表达检测；病毒特异性T细胞中Sema4D和抑制性受体PD-1/Tim-3的共表达检测等。我们研究发现，近6个月没有接受过抗病毒治疗的慢性HBV感染组患者血清中Sema4D水平较健康对照组显著下降；正在接受核苷类抗病毒治疗的慢性HBV感染组患者获得EVR者，Sema4D水平显著升高，恢复至正常水平，且该水平持续至SVR阶段；急性HBV感染组患者血清中Sema4D水平较健康对照组轻度下降，但无统计学差异。T细胞Sema4D表达与ALT水平呈负相关，与HBV DNA载量滴度之间呈负相关，提示Sema4D可能与HBV感染T细胞功能低下相关。本项目对于探讨Sema4D表达对T细胞免疫活性的调节作用及对相关细胞因子分泌的影响，揭示Sema4D在HBV感染T细胞应答中的作用，阐明HBV慢性持续感染分子机制具有重大意义。