同型半胱氨酸对结肠炎小鼠Th17细胞的调节作用及其分子机制研究

许多研究报道炎症性肠病患者血浆和肠黏膜同型半胱氨酸水平增高，且基因组学研究已经证实同型半胱氨酸代谢酶基因多态性与炎症性肠病的发病和严重程度相关，我们通过动物实验已经发现同型半胱氨酸水平增高会加重葡聚硫酸钠（DSS）诱导的大鼠肠道炎症反应，但同型半胱氨酸加重肠道炎症反应的最终促炎因子及其分子调控机制尚不明确。通过前期研究，我们推测同型半胱氨酸可能通过活化p38/细胞质磷脂酶A2（cPLA2）、诱导肠道COX2表达和PGE2产生，促进Th17细胞扩增来加重DSS诱导的肠道炎症反应，这将是本课题的研究内容。如能证实，我们将找到炎症性肠病的一种新病因及其致病机制。.我们还将研究能否通过补充叶酸降低同型半胱氨酸水平，来缓解或控制炎症性肠病，找到一种新的治疗炎症性肠病的有效方法，具有重大的科学意义和临床实用价值。

炎症性肠病患者体内同型半胱氨酸水平增高。同型半胱氨酸是一种促炎症分子，是心脑血管疾病的独立危险因素。高同型半胱氨酸（HHcy）是否与炎症性肠病的发病有关目前仍不明确。本研究调查同型半胱氨酸对葡聚糖硫酸钠（DSS）老鼠肠炎的影响及其机制。我们将老鼠随机分为七组：(1) 对照组; (2) HHcy组; (3) p38抑制剂组; (4) DSS组; (5) HHcy+DSS组; (6) HHcy+DSS+p38抑制剂组; (7) HHcy+DSS 组(21天) ; 和 (8) HHcy+DSS+folate 组(21天) 。给老鼠5%葡聚糖硫酸钠诱导肠炎，1.7%甲硫氨酸诱导高同型半胱氨酸血症模型，通过qRT-PCR检测-17mRNA水平，通过western-blotting检测IL-17, 核孤儿受体（retinoid-related orphan nuclear receptor-γt ,RORγt)，p38 MAPK, 磷酸化p38 MAPK, 磷脂酶A2 (cPLA2), 磷酸化cPLA2及环氧化酶2 (COX2)。我们发现与DSS组相比，HHcy+DSS组MPO活性、DAI评分及组织学评分均明显增高。同型半胱氨酸明显增加IL-17的血浆、肠组织mRNA和蛋白水平。同型半胱氨酸能激活p38 MAPK和cPLA2，增加环氧化酶2和核孤儿受体的蛋白表达水平，还能增加血浆前列腺素E2的水平。叶酸治疗能明显降低IL-17和核孤儿受体的表达水平。我们的研究提示同型半胱氨酸通过p38/cPLA2/COX2/PGE2途径刺激IL-17的表达来较重DSS小鼠的肠道炎症。补充叶酸能减少肠道同型半胱氨酸水平，降低DSS小鼠肠道炎症反应。