甘丙肽及其受体在产后抑郁大鼠模型中的表达及作用机制研究

The incidence of postpartum depression(PPD) in postpartum women was 15-20 % , in severe cases, PPD can be accompanied to harm the infant, and cause serious harm to the baby's development and mother’s health. Currently antidepressant drugs in clinical applications had some abuse,for exampe, the slow onset , side effects, and other effects of breast-feeding , causing many patients and their families nto give up drugs. The characteristics of neuropeptied were work fast and small side effects. Galanin (GAL) is widely present in brain areas associated with emotion , through three G protein-coupled receptors GalR1, GalR2, GalR3 play different biological functions. In the restraint stress , and other acute forced swimming depression model studies show , GalR1 / 3 plays induced depression -like effects in animals , but GalR2 play is antidepressant-like effects . However, the mechanism of the model of postpartum depression of GALRs and GAL has not been reported . So we first duplicated two postpartum depression animal models :ovarian estrogen withdraw and restraint stress during pregnancy PPD animal models, then,we use laser capture microdissection (LMD) method , injecting GALR1-SiRNA into special brain region. Study the expression of GAL and GALRs between control and PPD model groups. ,indentify Knockdown of GalR1 in the special region of PPD rats modeal produce antidepressant-like effects, and provide new biological targets for the treatment of postpartum depression .

产后抑郁在我国产后妇女的发病率为15-20%，严重时有杀害婴儿倾向。对产妇的身心健康，及婴儿的发育危害严重。临床应用的抗抑郁药物，起效慢、副作用大及影响哺乳等，致众多家庭放弃药物治疗。神经肽在疾病治疗方面具有起效快、副作用小的特点。甘丙肽（GAL）广泛存在于与情绪相关的脑区，通过三个G蛋白偶联受体发挥不同的生物学功能。在束缚应激、急性强迫游泳等抑郁模型中的研究表明，GalR1/3发挥着致抑郁样作用，而GalR2发挥的是抗抑郁样作用。但在产后抑郁模型中GAL是否可通过GALS参与到产后抑郁的发病机制中还未见探索。我们课题组在卵巢雌激素撤退及孕期束缚两种产后抑郁动物模型上，利用可精准定位脑核团的激光显微切割捕获技术，定位注射慢病毒包装的GALR1-SiRNA等方法，研究GAL及GALRs表达变化，验证GAL是否可通过GALR1在产后抑郁模型中发挥抗抑郁作用，为产后抑郁的治疗提供新的生物学靶点。

产后抑郁症（Postpartum depression, PPD）是女性在产后期最常见的一种抑郁障碍。不仅对母婴的身心健康造成严重损害，也对家庭及社会带来了沉重的经济负担。目前临床上有多种治疗手段均存在一定的局限性。而甘丙肽(GAL)及其受体(GALRs)与抑郁症的发病密切相关，且受雌激素水平的影响，但其与产后抑郁症的关系尚无报道。本课题利用两种目前较为公认的基于不同发病原因的两种大鼠产后抑郁模型，首次探讨了甘丙肽及其受体在产后抑郁症中可能发挥的作用及机制研究，其中“雌二醇撤退”产后抑郁模型主要模拟大鼠产后雌激素水平的撤退，此模型与激素水平密切相关。而“孕期应激”孕期束缚产后抑郁模型则主要模拟大鼠妊娠期的生活应激事件，与应激及HPA轴密切相关。.“雌二醇撤退”产后抑郁模型中，首先通过糖水偏好试验和强迫游泳实验验证PPD模型制备成果。通过对不同的与情绪相关脑区的c-fos蛋白水平及荧光免疫组化进行检测，我们发现在前额叶（PFC）、下丘脑室旁核（PVN）、中央杏仁核（CeA）、海马CA1区和CA3区均有一定程度的激活。但Q-PCR结果显示，PPD大鼠只在PFC中GalR1受体的表达较Cont及PPD_E组显著升高，且在此区GAR1与ERα的表达呈正相关。为检测其相关性，结果证明在原代培养的PFC神经元中雌二醇刺激可降低GalR1受体及ERα受体的表达水平, 进一步运用双荧光素酶报告基因检测技术，结果发现ERα受体可正向调控GalR1受体的基因表达。提示PPD模型PFC区，GALR1的表达改变由雌激素撤退所引起的ERα增高引起。PFC区注射慢病毒包装的siGAL1，降低GALR1及其下游p-ERK1/2的表达，运用HPLC和WB方法证实，GALR1通过5-HT系统和BDNF系统发挥抗抑郁作用。.“孕期束缚”产后抑郁模型中，在目前观察的PFC和PVN脑区尚未发现GAL及GALRs的变化, 目前正在检测其在与情绪相关的其它脑区的变化。由于此模型与HPA轴有关，而催产素（OXT）是HPA轴核心脑区PVN分泌。我们发现PPD组，PVN区OXT表达显著降低，在此区注射20ng OXT后通过TrkB发挥抗抑郁作用。