基于同位素多模板MIP-LC-MS技术的复杂体系中痕量雌激素分析新方法的研究

复杂体系中痕量雌激素的分析是分析科学家们面临的一个挑战。而对样品前处理的改进是迎接挑战的一个重要途径。分子印迹聚合物在样品的前处理中显示了特有的优势，得到了广泛的应用。但其模板的泄漏问题，制约了其在痕量组分分析中的应用；单一模板印迹方法制约了其在多组分同时测定中的应用。本研究针对上述问题，以PGMA微球为载体，采用表面印迹法，以单一或多个同位素标记的目标分子作为伪模板分子，制备分子印迹聚合物。以得到的分子印迹聚合物微柱为一维，C18 分析柱为二维，结合Q-TOF技术，建立复杂组分中痕量雌激素的分析方法。采用同位素伪模板，既解决了泄露带来的影响，又保证了聚合物的识别能力。采用多模板聚合体系，可以实现对多种组分的同时富集，扩展分子印迹技术在组学分析中的应用。本项目的研究不仅为分子印迹技术的发展提供了新思路和方法，而且对复杂体系中痕量组分的分析提供了新方法。

复杂样品中痕量组分分析中基质效应影响的问题是目前复杂样品分析中面临的一个难点问题，分子印迹的选择性可以很好地解决此类问题，但模板泄漏、识别能力不强和只能针对单一或单一种类分子的问题制约了分子印迹聚合物的应用和发展。针对以上问题，在印迹方法、模板分子种类、印迹溶剂及基质材料等方面进行了较系统的研究。研究内容包括：（1）以PGMA微球为基质，雌二醇为模型分子采用表面印迹技术制备分子印迹聚合物，将得到的分子印迹聚合物用于MCF-7细胞培养液中雌激素的检测，结合高效液相色谱技术，建立了生物样品中痕量雌激素的测定方法。（2）以氧氟沙星和17-雌二醇两种物质为模板分子制备双模板分子印迹聚合物，用于样品前处理中，实现了对牛奶样品中两类6种违禁添加剂的同时检测。（3）以链格孢酚毒素为模型分子，选择与链格孢酚毒素具有相同母环结构的BCPA（2-[(6-氧代-6H-苯并[c]色满-3-基)氧基]丙酸）为伪模板，采用原位聚合法合成了BCPA分子印迹整体聚合物。并用于食品中链格孢酚、链格孢酚甲醚、链格孢毒素毒素的分析。解决了目标物质价格昂贵不适宜做模板分子和分子印迹中模板泄漏的问题。（4）基于模板结合时带来的荧光强度的变化，发展了荧光分子印迹聚合物。将分子印迹和荧光技术结合，成功制备糖蛋白分子印迹聚合物荧光材料，用于糖蛋白的原位检测研究。（5）用SI-ATRP技术制备了苯硼酸功能化的材料，并用于糖蛋白的提纯和MALDI-TOF MS基质以检测具有邻二醇结构的小分子物质。这些研究成果不仅为分子印迹技术的发展提供了新思路和方法，而且对复杂体系中痕量组分的分析提供了新方法。发表论文8篇，其中SCI论文7篇，申报专利6项，获授权发明专利5项，培养硕士研究生13名。