HLA-G分子/NK细胞途径介导的子宫内膜免疫耐受状态在子宫内膜异位灶形成中的作用

Endometriosis is a common gynecological disease that seriously affect women's quality of life and reproductive functions. In this study, we are trying to reveal the corner of complex relationship between the endometrium and the immune system by borrowing the immunoediting theory. We assumed that endometrium are immune edited by the immune system, leading to immune tolerance mediated by the elevated expression of HLA-G molecules on the endometrial cells, to enable it to evade NK cell immune attack and to further the ectopic growth. Our previous studies have shown that HLA-G is expressed in ectopic endometrial epithelial cells, the change of the endometrial immunogenicity means the endometrium get the ability to evade immuneattack. On this this basis, design experiments intended①to confirme that the micro-environment of immune tolerance in the eutopic and ectopic endometrium by detecting the coexistence of the local inflammatory factors, NK cells and ectopic endometrial cells; ②to confirm that after immune editing, endometrium with high expression of HLA-G can effectively escape NK cell killing by experiments in vitro simulating in vivo microenvironment; (3)to confirm endometrium with high expression of HLA-G can effectively inhibit NK cell killing effect by the animal experiments

子宫内膜异位症是妇科常见病，严重影响女性的生活质量和生育功能。免疫功能失调在其发病中起一定的作用。本研究拟用免疫编辑理论来揭示子宫内膜与免疫系统间复杂关系的一角。设想子宫内膜受到机体的免疫编辑，导致子宫内膜细胞上的重要免疫耐受介导分子HLA-G表达升高，使其得以逃避NK细胞免疫攻击并能够进一步异位生长。本课题组的前期研究首次证实了HLA-G表达于异位子宫内膜腺上皮细胞中，意味着子宫内膜的免疫原性发生改变，获得了逃避机体免疫攻击的能力。在此基础上设计本实验，拟①通过检测内异症的在位和异位内膜，证实内膜局部炎性因子、NK细胞和异位内膜细胞共存的免疫耐受微环境；②通过模拟体内微环境的体外实验证实免疫编辑后高表达HLA-G的子宫内膜能有效逃避NK细胞的杀伤;③通过动物实验证实高表达HLA-G的子宫内膜能有效抑制NK细胞的杀伤作用。

子宫腺肌病是一种子宫内膜异位性疾病，其特点是子宫内膜腺体及间质向肌层良性浸润并在其中弥漫性生长。其确切的发病机理仍不十分清楚。子宫腺肌病患者的细胞免疫和体液免疫均增强，但免疫系统却未能起到有效监视和清除异位内膜的作用。我们从免疫编辑的角度提出假设：子宫内膜受到机体的免疫编辑，导致子宫内膜细胞上的重要免疫耐受介导分子HLA-G 表达升高，使其得以逃避NK 细胞免疫攻击并能够进一步异位生长。为验证这一假设，我们设计了这一课题，通过免疫组化、原位杂交、细胞培养及干预等研究来证实子宫腺肌病异位内膜局部存在免疫耐受的微环境及造成这一微环境的可能机制。.通过本课题的研究，我们得到如下结果：1.子宫腺肌病患者在位内膜和异位灶中均存在免疫耐受分子HLA-GmRNA和HLA-G蛋白的表达，而正常子宫内膜中未发现该分子的存在，说明HLA-G可能通过建立局部的免疫耐受和免疫抑制的微环境而参与子宫腺肌病的发生发展。2.子宫腺肌病患者在位内膜和异位灶中均存在较高水平的HLA-G诱导分子IL-10的表达，而正常子宫内膜中该分子表达水平较低，说明IL-10可能通过建立局部的免疫耐受和免疫抑制的微环境而参与了子宫腺肌病的发生发展。3. IL-10和HLA-G在子宫腺肌病中的表达存在相关性。4.与正常子宫内膜组织相比，IL-10和IL-10R1在腺肌病病灶组织和在位内膜组织中的表达呈现出明显差异，该结果提示IL-10R1可能在子宫腺肌病的发生发展过程中的免疫耐受诱导和/或炎性过程方面发挥了重要作用。5. 体外实验中证实rIL-10刺激子宫腺肌病患者的子宫内膜腺上皮细胞HLA-G的表达量增加；rIL-10刺激子宫腺肌病患者表达HLA-G可能是通过IL-10 R1起作用，rIL-10诱导HLA-G的产生使子宫腺肌病患者异位子宫内膜产生免疫抑制作用。6.首次证实神经细胞黏附因子NCAM1在子宫腺肌病异位病灶的高表达且与患者痛经程度呈正相关，推测其可能通过参与改变EMI局部微环境而促进了子宫腺肌病的发生发展，并可能通过促进神经纤维生长参与了子宫腺肌病相关痛经的发病机制。.本研究的意义在于在子宫腺肌病灶中首次证实了间质组织中IL-10通过IL-10受体诱导腺上皮细胞高表达HLA-G分子，从而在异位病灶中形成免疫耐受的微环境，致使异位病灶不能被免疫系统有效识别并清除。此外，在本研究过程中还意外发现神经细胞黏附因