祛风止动方干预TD模型大鼠DA和5-HT水平节律变化及治疗时辰选择的机理研究

抽动障碍（TD）是儿童神经精神疑难性疾病，发病日渐增多，中药治疗优势显著,中药对神经递质失衡的调节是药理机制核心环节。课题组前期研究示,祛风止动方治疗TD有显效,显著减低模型大鼠纹状体多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)受体表达水平。国外研究发现正常大鼠纹状体DA和5-HT不同时间段释放和分解具有节律变化,但DA、5-HT水平节律变化与TD发作相关性未见报道。.本项目（1）首次采用先进的PET/CT研究TD模型大鼠纹状体DA、5-HT水平节律变化，及其与子午流注的相关性；探讨TD发病时辰与DA、5-HT水平节律变化的相关性。（2）采用RT-PCR从基因水平检测DA、5-HT受体mRNA表达,研究中药复方对其节律变化的调控作用，确立中药对其变化干预的药效学机理。.本项目从DA、5-HT水平节律变化和子午流注相关性这个新视点揭示TD发生机制,探索药物作用机制,为中药复方防治TD提供新的研究思

抽动障碍（TD）是一种起病于儿童和青少年时期，具有明显遗传倾向的神经精神障碍性疾病，是儿科临床的难治性疾病之一。目前缺乏系统深入的相关研究。.本项目从神经递质水平节律变化与子午流注的相关性这一独特角度开展了一系列系统深入的研究，创新性的将“小动物PET/CT影像平台”引入TD研究，多角度多层次的揭示TD的发病机制，创新性提出“择时服药”治疗TD的新理念。研究成果为进一步揭示TD的病因病机，药物治疗靶点指明了方向，为指导临床治疗奠定了基础。.项目①首次对祛风止动方的质控标准和药代动力学进行研究，为祛风止动方的质控建立与TD治疗的研究奠定了基础。②创新性的对TD神经递质的变化规律及与子午流注的相关性进行研究，结果显示：大鼠纹状体中DA和5-HT的释放均呈现节律性变化。大鼠纹状体中5点（寅时）时DA浓度最高， 17点（酉时）时5-HT浓度最低;大鼠的行为学变化也具有节律性特点。在5:00（寅时）左右兴奋性最高，故依据子午流注理论用药时可根据脏腑气血旺衰选择相应的时辰，寅时是一个进行药物干预的重要时间点，填补了TD大鼠神经递质节律变化研究与“择时给药”的空白。③基于HPLC法、荧光定量PCR和Western Blot对祛风止动方治疗TD的最佳给药时间和起效天数研究显示：2:00（丑时）灌胃组纹状体内DA含量最低、DRD2mRNA表达量和多巴胺受体D2蛋白表达最高；灌胃第3天开始模型大鼠纹状体中DA含量开始明显下降、DRD2mRNA表达量和多巴胺受体D2蛋白表达量开始升高，祛风止动方起效时间为3天。表明时肝旺之和肺旺之时均是药物干预的重要时间点，可以取得显著疗效，但在肝旺之时干预疗效更佳。④基于PET/ CT平台研究显示：TD发病机制可能与纹状体高代谢有关，与纹状体内多巴胺D2受体减少被抑制有关；祛风止动方能明显降低模型大鼠纹状体代谢水平，其作用区域在纹状体；而多巴胺D1、D2受体以及5-HT2a受体是其治疗TD的重要作用位点。基于HPLC法、荧光定量PCR和Western Blot研究显示祛风止动方干预TD大鼠疗效确切，可以上调TD大鼠纹状体D2受体的表达和下调多巴胺的含量。该方可减少TD模型大鼠刻板动作，降低运动水平，有效缓解TD的兴奋性、敏感性，改善适应力。明确了祛风止动方对中枢神经递质调控机制和作用区域，为其靶向治疗TD提供有力依据。