肝癌介入栓塞治疗对肝癌转移的影响及其机制的实验研究.

经肝动脉栓塞是治疗不能手术肝癌的最主要方法。栓塞治疗的病例大部分是手术筛选后有了转移的病人,栓塞对转移的影响问题更加突出。但我们至今不知道栓塞会抑制转移还是会促进转移,对不同阶段的转移影响又有什么不同? 我们如何才能在提高栓塞疗效的同时控制转移? 本课题拟回答上述问题并探讨栓塞对转移影响的机理。实验用绿色荧光蛋白(GFP)标记McA-RH7777 肝癌细胞在Buffalo大鼠肝脏建瘤, 明确肝癌最早转移的时间，分布，和进展。在转移的不同阶段模拟临床栓塞后检测肝癌和转移的进展以分析栓塞与转移的互动影响。在活体显微镜下定量观测栓塞后肝癌细胞在肝动脉和门静脉中的存活机会, 并与转移形成和生存时间作相关对照,探讨栓塞对转移影响的机理。本实验为科学的治疗方案设计提供依据，在改进栓塞疗效的同时避免过度治疗。

经肝动脉栓塞是治疗不能手术肝癌的首选方法，但肝癌的复发和转移仍严重制约着临床疗效。栓塞会抑制还是促进转移至今仍无定论,而栓塞对不同阶段的转移影响又有什么不同? 我们如何才能在提高栓塞疗效的同时控制转移? 本课题中，我们成功构建稳定表达绿色荧光蛋白的McA-RH7777细胞株，并对其生物学特性进行评价。建立了具有高转移潜能的稳定表达绿色荧光蛋白的肝癌大鼠移植瘤模型，并对该模型的生物学特性进行了详细研究，明确肝癌最早转移的时间，分布和进展，为肝癌的动物实验研究提供了基础。我们的研究结果显示在大鼠肝癌模型上，经动脉栓塞治疗微转移期肝癌，大剂量的碘油栓塞能抑制肿瘤生长，降低肺转移，但栓塞造成的缺氧能引起Twist转录因子水平增加，诱导肝癌细胞发生EMT，从而促进肝癌细胞侵袭和转移能力的增加。临床上TACE术前和术后6-8周的外周和肝静脉循环肿瘤细胞（CTCs）是TACE术后HCC患者预后强力的独立预测因子，同时TACE可以降低患者CTCs水平。活体显微镜下可以清楚观察到大鼠肝小叶的结构并能观察表达绿色荧光细胞在血管内的游走、定植，该技术可用于后续的实验研究。我们同时研究了微波消融后亚致死量的热损伤诱导McA-RH7777肝癌组织和CTCs发生EMT并增加其增殖和侵袭能力，表现出更高的恶性潜能；热损伤后Twist表达上调可能是肿瘤细胞发生EMT和侵袭增加的重要机制之一。三氧化二砷（ATO）能诱导McA-RH7777大鼠肝癌细胞凋亡，抑制细胞的增殖；TAE后联合ATO具有显著的抗肿瘤作用，能抑制肿瘤的进展和转移。此外，TACE联合厌氧菌或万特普安亦有不错的协同抗肿瘤作用。本课题进一步证实了TACE在肝癌治疗中的重要作用，并深入阐述了肝癌治疗后生物学特性的变化及其机制。TACE虽然会引起肿瘤细胞发生EMT，但血管的栓塞却可以显著降低CTCs水平从而降低肿瘤转移的几率，因此在进一步巩固TACE在肝癌治疗中重要地位的同时，我们应积极探索以TACE为基础的多学科、多手段联合治疗，以进一步提高肝癌患者的临床疗效。