Toll样受体9信号通路在孕早期母胎界面HCMV感染中的作用及机制研究

人巨细胞病毒(HCMV)宫内感染可引起胎盘炎症、血管内皮损伤、栓塞而影响胎儿血供；HCMV侵入胎儿，影响胎儿生长发育，导致胚胎及胎儿发育缺陷和死亡等。机体抗病毒固有免疫机制与孕早期母胎界面HCMV感染的转归密切相关，但机制不明。前期研究发现HCMV感染上调Toll样受体9(TLR9)在胎盘绒毛、蜕膜、浆细胞样树突状细胞（pDCs）中的表达 ，但TLR9信号通路在HCMV宫内感染中的作用及机制尚不明确。本项目检测TLR9信号通路在HCMV感染合并胚胎停育或早孕活胎、HCMV阴性早孕活胎妇女胎盘绒毛、蜕膜、pDCs中的表达改变情况，分析其与HCMV宫内感染的关系；以培养的绒毛组织、滋养细胞、蜕膜、pDCs为模型，HCMV体外感染，利用转染/干扰、激动剂激活、中和抗体抑制TLR9信号通路，来研究TLR9信号通路在HCMV宫内感染中的作用及机制，为寻求HCMV宫内感染阻断的策略和靶点提供理论依据。

人巨细胞病毒(HCMV)宫内感染可引起胎盘炎症、血管内皮损伤、栓塞而影响胎儿血供；HCMV侵入胎儿，影响胎儿生长发育，导致胚胎及胎儿发育缺陷和死亡等。机体抗病毒固有免疫机制与孕早期母胎界面HCMV感染的转归密切相关。研究HCMV在早孕妇女体液（血液、尿液、宫颈分泌物）里复制与母胎界面HCMV感染及胚胎停育的关系。共有101例妇女宫颈分泌物HCMV DNA阳性，其中胚胎停育组的阳性率为10.9% (48/440 例) ，正常早孕组的阳性率为8.5% (53/624 cases) (P >0.05). 101 例 (其中63 例为宫颈分泌物HCMV DNA阳性，38 例为宫颈分泌物HCMV DNA阴性)妇女接受胎盘绒毛和蜕膜HCMV DNA检测。在63 例宫颈分泌物HCMV DNA阳性的妇女中，5例 (5/63例，7.9%; 2例正常早孕妇女和3例胚胎停育妇女) 妇女的胎盘绒毛和/或蜕膜组织显示阳性的HCMV DNA；在38 例为宫颈分泌物HCMV DNA阴性的妇女中，胎盘绒毛和/或蜕膜组织均显示阴性的HCMV DNA。 胚胎停育组较正常早孕组有较高的胎盘绒毛和/或蜕膜组织HCMV DNA阳性率(9.1% [3/33]) 和(6.7% [2/30])，但是没有统计学意义 (P >0.05)。有较高宫颈分泌物和胎盘绒毛/蜕膜组织HCMV 载量的2例均为胚胎停育妇女。这些发现提示：在正常免疫的孕早期妇女中，血液里HCMV DNA 水平较尿液及宫颈分泌物里低，HCMV 在宫颈分泌物里复制可能与HCMV宫内感染和垂直传播；HCMV在宫颈分泌物和胎盘绒毛/蜕膜组织中复制可能增加胚胎停育风险。Toll样受体9(TLR9)作为天然免疫防御巨细胞病毒感染的基本分子。TLR9在胎盘绒毛及蜕膜组织中表达，HCMV感染诱导TLR9在胎盘绒毛、蜕膜中的表达。体外培养早孕绒毛滋养细胞和滋养细胞系显示HCMV感染上调TLR 9 的表达，并增加I型干扰素的释放，TLR 9 RNAi 干扰阻断TLR 9作用后，TLR 9 表达减少。HCMV感染后，TLR 9 蛋白及mRNA表达得到调控。TLR 9是一个病毒应答蛋白，它在人类滋养细胞及蜕膜细胞中表达，TLR 9在HCMV母胎界面感染及宫内感染中发挥重要作用，为HCMV宫内感染的阻断策略和靶点提供理论依据。