ANP32A参与MEK信号通路调控大肠癌细胞侵袭及迁移的功能及机制研究

Till now, the effective molecular targrt of metastasis haven't been found, so it is important to investigate the new target therapy markers of metastasis colorectal cancer. ANP32A is a multifunctional protein that regulates differentiation, transcription, apoptosis, and cell cycle progression. ANP32A has been considered a tumor suppressor, while recently it has been found involved in the invasion and migration of oral cancer, and can be a potential prognostic markers for oral cancer. We found that it is high expressed in colorectal cancer patients, and was positively correlated with tumor grading. But whether ANP32A is associated with colorectal cancer metastasis, and how its mechanism needs further study. Therefore, in this project, we will confirm its function from the following aspects: ① determine the position and expression of ANP32A in colorectal cancer cells; ② clarify the relationship between ANP32A and metastasis of colorectal cancer, reveal its mechanism; ③the correlation between ANP32A and EMT markers in colorectal cancer patients with its clinical significance. The completion of this project will help clarify the relationship between MEK signaling pathway and colorectal cancer metastasis; provide a new target for the early diagnosis and treatment of colorectal cancer.

目前晚期伴远处转移的大肠癌研究中尚未发现有效的分子靶向标记物，探索新的靶向治疗标记物及其分子机制对完善大肠癌转移机制的认识非常重要。ANP32A是一种具有多功能的蛋白质，具有调节分化，转录，调亡及细胞周期进程的功能。一直以来，它被认为是一种肿瘤抑制因子，但是最近发现其参与了口腔癌的转移，是口腔癌的潜在预后标记物。我们前期发现它在大肠癌患者的病理组织中高表达，与肿瘤的分级正相关。但是ANP32A是否与大肠癌转移相关，以及其机制如何需进一步研究。因此，在本项目中，我们将从以下几个方面进行确证：①确定ANP32A在大肠癌细胞中的定位与表达；② 明确ANP32A与大肠癌细胞迁移及侵袭能力的关系，阐明其作用机制；③大肠癌患者ANP32A及EMT标记物的表达及临床意义。本项目的完成将有助于阐明MEK信号通路与大肠癌转移的关系，为大肠癌的早期诊断和治疗提供新的靶点。

目前晚期伴远处转移的大肠癌研究中尚未发现有效的分子靶向标记物，探索新的靶向治疗标记物及其分子机制对完善大肠癌转移机制的认识非常重要。ANP32A是一种具有多功能的蛋白质，具有调节分化，转录，调亡及细胞周期进程的功能。一直以来，它被认为是一种肿瘤抑制因子，但是最近发现其参与了口腔癌的转移，是口腔癌的潜在预后标记物。我们前期发现它在大肠癌患者的病理组织中高表达，与肿瘤的分级正相关。在这项研究中，我们利用免疫荧光确定ANP32A在大肠癌中的定位；慢病毒转染沉默ANP32A，建立ANP32A的稳定细胞系，分析ANP32A沉默与大肠癌侵袭迁移的关系，同时观察其与EMT，p38, ERK，Akt以及MEK信号通路之间的关系。.其主要结果如下：.1.ANP32A在结肠癌组织中高表达，免疫荧光发现其细胞内的细胞核，细胞质和细胞膜上均有表达。.2.沉默ANP32A能抑制大肠癌的侵袭迁移，而过表达ANP32A能促进大肠癌的侵袭迁移。.3.ANP32A与EMT密切相关，能上调b-catenin 以及下调E-cadherin的表达，促进大肠癌细胞的EMT进程。.4.ANP32A的沉默能抑制ERK和Akt的活化，ERK的激动剂（PMA）以及Akt的激动剂（SC79）均能逆转ANP32A沉默导致的侵袭能力减弱，而ERK的抑制剂（PD98059）以及Akt的抑制剂（MK2206）能增强ANP32A沉默导致大肠癌细胞侵袭迁移的抑制作用。.5.体内移植瘤实验也表明ANP32A的沉默能抑制大肠癌的增殖及EMT，失活ERK及Akt, 而ANP32A的过表达则能促进大肠癌的增殖及EMT，促进ERK及Akt活化。.6.ANP32A的沉默还能活化p38，下调p38能促进结肠癌细胞的增殖及侵袭，且p38下调促进结肠癌迁移的作用可部分被ANP32A沉默所逆转。