MRP8/MRP14-CXCL10在失血性休克后急性肺损伤中的作用和机制研究

Acute lung injury/acute respiratory distress syndrome is one of the leading causes of death in critically ill patients with trauma/hemorrhagic shock. Damage-associated molecular patterns (DAMPs), as important inflammatory molecules, play critical roles in hemorrhagic shock-induced acute lung injury. We found that circulating MRP8/MRP14 levels were highly expressed in human blunt trauma/hemorrhagic patients. And MRP8/MRP14 can induce the expression of interferon-γ inducible protein 10 (IP-10/CXCL10) in monocytes/macrophages, furthermore, circulating IP-10 levels in human blunt trauma patients were correlated positively with MRP8/MRP14 levels. However，we know little about the mechanism of CXCL10 production induced by MRP8/MRP14. Based on these findings, we intends to use qRT-PCR, Luminex xMAP, Western blot, in vitro chemotaxis assay, air pouch, animal model and neutralizing antibody technology, to elucidate the signaling pathway and biological significance of CXCL10 induced by MRP8/MRP14, furthermore to explore function of MRP8/MRP14-CXCL10 in hemorrhagic shock induced acute lung injury, finally in order to provide new strategy and target spot for clinical therapy of acute lung injury.

急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征是创伤/失血性休克重症患者死亡的主要原因之一，DAMPs作为机体重要的炎症相关分子，在其中发挥着极为重要的作用。前期研究发现：一种新型的DAMPs分子MRP8/MRP14在创伤/失血性休克患者血清中存在高水平表达；而且MRP8/MRP14能够显著诱导单核/巨噬细胞IP-10/CXCL10的表达，两者呈正相关。但MRP8/MRP14诱导CXCL10生成具体的作用机制我们尚不清楚，本项目拟在前期工作基础上，利用qRT-PCR、Luminex xMAP、Western印迹、体外趋化实验、Air pouch、动物模型、中和性抗体等技术，鉴定MRP8/MRP14诱导单核/巨噬细胞CXCL10生成的信号机制及生物学意义，探索MRP8/MRP14-CXCL10在失血性休克后急性肺损伤中的重要作用，从而为临床急性肺损伤的治疗提供新的思路和可能的靶点。

急性肺损伤（Acute Lung Injury, ALI）病情发展迅速，预后险恶，死亡率高达26~35%，严重威胁人类健康。损伤相关模式分子（DMAPs）作为机体重要的炎症相关分子，在其中发挥着极为重要的作用。MRP8和MRP14是新近鉴定的重要的内源性DAMPs。本研究旨在前期研究基础上，探讨MRP8/MRP14诱导单核-巨噬细胞IP-10表达的分子机制及其生物学意义，探索MRP8/MRP14-IP-10在急性肺损伤中的重要作用。.本研究鉴定了MRP8/MRP14诱导单核/巨噬细胞IP-10表达的信号机制，MRP8/MRP14诱导单核/巨噬细胞IP-10 mRNA的表达呈现“双峰”效应，IP-10 mRNA的表达分别在MRP8/MRP14刺激后早期（6h）和晚期（12h）均出现高峰； 研究结果表明MRP8/MRP14通过诱导细胞IFN-beta mRNA的表达，进而激活JAK1/Tyk2-STAT1/STAT2信号通路，诱导单核/巨噬细胞“晚期”IP-10的生成；MRP8/MRP14能够持续趋化CXCR3+淋巴细胞到达炎症损伤部位，这一效应依赖于“晚期”IP-10的持续生成；脓毒性休克急性肺损伤小鼠肺组织中MRP8、MRP14、IP-10其受体CXCR3 mRNA均有高水平表达，MRP8/MRP14二聚体蛋白能够刺激小鼠肺组织IP-10及其受体CXCR3 mRNA高水平表达；且MRP8/MRP14能够直接引起小鼠肺组织HE改变以及血清炎性细胞因子的表达，IP-10中和性抗体以及CXCR3基因敲除能够显著抑制这些改变。