基于分子伴侣HSP70/CHIP与NF-kB炎症平衡体系的清热益气通窍法干预CRS上皮炎症的研究

慢性鼻－鼻窦炎（CRS）是鼻科常见难治病，严重影响人类健康。课题组前期在自然科学基金资助研究过程中，意外发现具有清热益气通窍功效的鼻渊舒口服液，可通过抑制NF-kB向胞核易位而对CRS起治疗作用，但其机制是什么？关键靶点在哪里？由于研究方向所限，未进一步深入探索。近年研究显示，分子伴侣HSP70/CHIP系统通过抑制NF-kB转位入核及活化，调节了NF-kB促炎通路，两者间构成了一个炎症平衡体系，保证了炎症反应的正常进行，避免炎症反应迁延。故我们推测，清热益气通窍治法在治疗CRS过程中，也可能存在通过干预HSP70/CHIP系统，进而调控NF-kB的核易位和活化这一机制。因此，本课题设计从HSP70/CHIP、NF-kB炎症平衡体系的角度，采用免疫印迹、实时定量PCR等方法，进一步探索清热益气通窍法治疗CRS的可能机制，为中医药治疗CRS这一常见难治性疾病提供一定的现代分子生物学理论支持。

慢性鼻－鼻窦炎（chronic rhinosinusitis，CRS）是鼻科常见病、难治病之一，其病程长，反复发作，难以治愈，对耳、鼻、咽、喉以及气管、支气管、肺的生理功能均可产生不利影响。清热益气通窍治法是中医耳鼻喉科临床治疗CRS的常用治法，其治疗CRS机制的揭示对促进该治法的推广具有重要意义。课题组基于前期实验研究基础，在3年的研究周期内，成功建立了C57BL/6J小鼠等CRS实验动物模型，并以鼻渊舒为载体药物，采用分子生物学等多种现代生物医学研究方法，从HSP70/CHIP与NF-kB炎症通路平衡的角度，对该治法的可能治疗机制进行了相关实验探索。研究结果显示：清热益气通窍的鼻渊舒口服液能够显著改善CRS模型挠鼻、喷嚏、流涕、溢泪及结膜充血水肿等局部症状；抑制其鼻窦黏膜慢性炎症，减轻慢性炎细胞浸润，促进鼻窦黏膜纤毛修复。CRS模型鼻窦黏膜上皮存在COX-2、RANTES等炎症因子基因表达及NF-kBp50蛋白表达上调，IKK活性亦出现增高；同时其鼻窦黏膜上皮CHIP、HSP70、HSF1等基因及蛋白表达下降。清热益气通窍的鼻渊舒口服液，能够抑制CRS模型鼻窦黏膜COX-2、RANTES等基因表达，对其NF-kBp50蛋白表达及IKK活性亦有一定抑制作用；同时该清热益气通窍药物能够促进CHIP、HSP70、HSF1等基因及蛋白表达。以上研究结果提示：CRS模型鼻窦黏膜慢性炎症状态的发生与NF-kB通路活化，进而引起COX-2、RANTES等炎症因子大量表达有关；清热益气通窍的鼻渊舒口服液降低COX-2、RANTES等炎症因子表达的作用，与其抑制NF-kB通路活化有关；CRS病变过程中，鼻窦黏膜NF-kB通路活化与黏膜上皮细胞内HSF1及CHIP表达降低，引起HSP70分子伴侣系统功能下降，进而影响其对NF-kB通路的抑制有关；清热益气通窍的鼻渊舒口服液抑制鼻窦黏膜上皮NF-kB通路活化的机制，可能与其促进HSF1及CHIP表达，进而提高HSP70分子伴侣系统功能有关。首次从HSP70分子伴侣系统角度初步揭示了CRS的发生及中医药对CRS的治疗机制。. 在本项目经费资助下，截至2014年底，课题组已在中文核心期刊发表标注国家自然科学基金资助论文5篇，培养硕士研究生4名。