Th9细胞在TL1A相关实验性结肠炎中的作用与机制研究

Intestine mucosal dysimmunity plays a core role in the pathogenesis of inflammatory bowel disease (IBD). CD4+T cells are the key effector cells in immune system, a new subsets of Th9 cell. With the secretion of specific pro-inflammatory cytokine IL-9, regulated by JAK/STAT signaling pathway, Th9 cells can deteriorate a variety of autoimmune inflammation. Additionally, Th9 cells play a key role in the autoimmune diseases, but only a few reports showed the relationship between Th9 and IBD. TL1A was found to enhance the Th1, Th2 and Th17 cell responses in chronic colitis model, however, the activation, differentiation of Th9 cells and expression of IL-9 are still unknown. TL1A transgenic mice with lymphocytes over-expressed TL1A and WT mice will be used for this study, DSS-induced murine colitis model will be established and splenic cells and mesenteric lymph node (MLN) will be isolated, purified and differentiated into Th9 cells and treated by TL1A and TL1A antibody for investigation of the relationship between TL1A and Th9, which might provide a new evidence for prevention and treatment of IBD.

肠黏膜免疫异常在炎症性肠病(IBD)发病中发挥重要作用。CD4+T细胞是免疫系统中最重要的效能细胞。其中Th9细胞是新发现的一种CD4+T细胞亚群，主要通过分泌IL-9发挥促炎作用，JAK/STAT是其重要调控通路。Th9参与多种自身免疫性疾病的发生，亦有少数报道其可促进IBD进程。最近研究发现TL1A通过活化Th1、Th2和Th17细胞加重IBD，而仅有少数研究报道在过敏性肺炎小鼠模型中TL1A可促进Th9分化和IL-9生成。但目前尚无TL1A与Th9联合作用在IBD中的研究。本实验拟采用淋巴细胞系高表达TL1A的转基因小鼠及野生型小鼠为研究对象，建立DSS诱导的急、慢性实验性结肠炎模型，分离培养脾脏和肠系膜淋巴结单个核细胞体外诱导分化Th9细胞并应用TL1A及其抗体干预，在动物和细胞水平探讨TL1A对Th9细胞分化、分泌功能、募集以及黏膜屏障的影响，以期为IBD的防治提供新的理论依据。

肠黏膜免疫异常在炎症性肠病(IBD)发病中发挥重要作用。CD4+T细胞是免疫系统中最重要的效能细胞。其中Th9细胞是新发现的一种CD4+T细胞亚群，主要通过分泌IL-9发挥促炎作用。Th9参与多种自身免疫性疾病的发生，亦有少数报道其可促进IBD进程。最近研究发现TL1A通过活化Th1、Th2和Th17细胞加重IBD，而仅有少数研究报道在过敏性肺炎小鼠模型中TL1A可促进Th9分化和IL-9生成。但目前尚无TL1A与Th9联合作用在IBD中的研究。本实验拟采用淋系细胞过表达TL1A的转基因小鼠及具有相同遗传背景的野生型小鼠为研究对象，建立DSS诱导的慢性实验性结肠炎模型，造模成功后给予小鼠腹腔注射IL-9抗体，并分离培养脾脏和肠系膜淋巴结单个核细胞，体外诱导分化成为Th9细胞，应用TL1A刺激，再分别加入TL1A抗体和IL-9抗体进行干预，在动物和细胞水平探讨TL1A在慢性实验性结肠炎中对Th9细胞及IL-9的作用与机制及IL-9抗体对慢性实验性结肠炎小鼠炎症的影响。以期为IBD的防治提供新的理论依据。结果发现：在DSS诱导的慢性实验性结肠炎中Th9细胞分化及IL-9的表达明显增加，TL1A转基因组增加更为明显，提示TL1A在慢性实验性结肠炎发病过程中促进了Th9细胞的分化及IL-9的生成，进而促进慢性实验性结肠炎的发生。 TL1A促进了Th9细胞的诱导分化；TL1A通过上调PU.1的表达，促进Th9细胞诱导分化及IL-9分泌，因此，TL1A调控PU.1的表达是其诱导Th9细胞分化及IL-9分泌的机制之一。 IL-9抗体对慢性实验性结肠炎具有治疗作用，IL-9 抗体在直接拮抗IL-9的同时，能够下调PU.1的表达，减少Th9细胞的分化，进一步导致IL-9生成减少。