PI3K/AKT信号传导通路在人胚胎生殖干细胞对卵巢癌作用中的调控机制研究

PI3K/AKT信号传导通路与细胞的增殖、分化、凋亡等密切相关, 对正常和肿瘤细胞生长都至关重要。胚胎干细胞是目前所知最全能的细胞，具有自我更新定向分化的潜能，其自我调节方式及信号通路表达均正常。人胚胎生殖干细胞(hEGCs)来自于胎儿生殖嵴的原始生殖细胞，在生物学行为上与胚胎干细胞相似，且取材方便。我们前期已经建立了hEGCs体外培养体系，发现将hEGCs与卵巢癌细胞共培养可使后者生长明显受到抑制，并初步发现此过程中与PI3K/AKT通路相关蛋白的差异表达，提示PI3K/AKT通路在其中发挥作用。本课题目的是在前期研究基础上，深入分析hEGCs作用于卵巢癌细胞过程中PI3K/AKT信号通路的变化，探讨其确切调控机制，并应用抑制剂特异性阻断PI3K/AKT信号通路，再进一步研究PI3K/AKT通路对卵巢癌动物模型的影响，探讨hEGCs对卵巢癌的作用，并为治疗提供靶点。

PI3K/AKT信号传导通路与细胞的增殖、分化、凋亡等密切相关, 对正常和肿瘤细胞生长都至关重要。胚胎干细胞是目前所知最全能的细胞，具有自我更新定向分化的潜能，其自我调节方式及信号通路表达均正常。人胚胎生殖干细胞(hEGCs)来自于胎儿生殖嵴的原始生殖细胞，在生物学行为上与胚胎干细胞相似，且取材方便。本研究中，我们通过建立hEGCs体外培养体系，将hEGCs与卵巢癌细胞共培养，后者生长受到明显抑制。随后进行了Tunel凋亡检测，发现实验组中凋亡信号较对照组明显增多。我们进一步对参与PI3K/AKT信号传导通路的caspase-9蛋白进行了检测，发现共培养组的caspase-9阳性信号明显多于对照组。提示PI3K/AKT通路在其中发挥作用。进一步的体内外实验发现PI3K/AKT信号通路的多个靶元件均参与了该抑制作用的调控。最后，我们应用抑制剂特异性阻断PI3K/AKT信号通路，再进一步检测了hEGCs对卵巢癌动物模型的影响，验证了PI3K/AKT信号传导通路在此过程的调控作用。在明确了PI3K/AKT信号传导通路在hEGCs对卵巢癌抑制作用中的确切机制后，将来可以有针对性的对PI3K/AKT信号传导通路进行各种形式、多种途径的阻断，从而为卵巢癌的生物治疗提供作用靶点。