刺蒺藜不同浓度及配伍对斑马鱼黑素细胞的调节作用及分子机制研究

Tribulus terrestris is one of the most commonly used effective drugs in pigment aplastic diseases .Plenty of clinical experiments show that tribulus terrestris has two-sides to regulate pigment metabolism function. It can be used to treat pigment increased disease, also can be used in the treatment of skin pigment decreased disease. To discuss the function about pigment network in signal transduction and molecular mechanism, This study based on traditional Chinese medicine to reconcile blood method with the models of melanocyte and zebrafish.We choose the most used drugs which are usually coupled with Tribulus,and use technology and experiment technology cytology zoology, from signal transduction pathways, related proteins in such aspects as the expression of genes to explore briers thorn two-way adjusting melanocyte from the molecular mechanism provide scientific basis for tribulus terrestris treating pigment aplastic diseases. It has practical significance to the traditional Chinese medicine for the curative effect of disease and improve pigment theory innovation.

刺蒺藜是临床治疗色素代谢障碍性疾病最常用的有效药物之一，大量临床实验表明刺蒺藜具有双向调节色素代谢的功能，既可以用来治疗色素增加性皮肤病，也可用于治疗色素减退性皮肤病，为进一步探讨其对黑素代谢的调节机制，本研究利用斑马鱼模型，基于中医调和气血法，选择祛风、活血、补肝肾常用药物与刺蒺藜配伍，从细胞信号转导通路、相关蛋白基因的表达等方面入手，深入研究刺蒺藜不同浓度、不同配伍下对斑马鱼黑素细胞色素代谢、细胞增殖、信号转导的作用，探讨其调节黑素细胞的分子机制，进而为刺蒺藜治疗不同色素病的配伍及应用剂量提供科学依据，这对中医药治疗色素病的疗效提高与理论创新都有现实意义。

刺蒺藜是临床治疗色素代谢障碍性疾病最常用的有效药物之一，大量临床实验表明刺蒺藜具有双向调节色素代谢的功能，既可以用来治疗色素增加性皮肤病，也可用于治疗色素减退性皮肤病，为进一步探讨其对黑素代谢的调节机制，本研究利用斑马鱼模型，基于中医调和气血法，选择祛风、活血、补肝肾常用药物与刺蒺藜配伍，从细胞信号转导通路、相关蛋白基因的表达等方面入手，深入研究刺蒺藜不同浓度、不同配伍下对斑马鱼黑素细胞。通过研究，我们得出以下结论（1）在斑马鱼的模型中仅表现出抑制黑素增殖和下调酪氨酸酶的抑制作用。使用斑马鱼模型并没有体现出“调和气血法”指导下的配伍中药对黑色素的双向调节作用，但药物配伍在基因水平上可对黑素合成产生影响。（2）刺蒺藜对色素调节具有双向调节作用，在SK-MEL-23和B16F10两个细胞模型中均可体现，对蒺藜治疗不同色素病的配伍及应用剂量提供了一定的科学依据。（3）本实验对常于黑色素研究的模型进行对比，发现A375人黑色素瘤细胞因自身无法分泌黑色素，不适合应用于黑素代谢的研究；原计划选择的人正常黑素细胞培养条件较高，生长速度缓慢，培养价格昂贵和斑马鱼幼鱼饲养条件高，对环境和药物过于敏感，基因表达量受自身发育时间影响太大等缺点，传统的B16鼠黑素瘤细胞和近年新兴的SK-MEL-23细胞相比之下培养周期更短和费用低，实验结果稳定，更适合用于黑色素代谢的研究。