用冰晶核蛋白构建假单胞菌细胞表面展示体系及性能研究

本研究拟通过克隆丁香假单胞菌冰晶核蛋白基因inp和测序，再分别扩增该基因全长和截断的不同成分，来与绿荧光基因gfp相融合，并插入假单胞菌表达载体后构建成多个具细胞表面展示活性的载体。进一步对各载体进行定位分析、参与体系的各结构成分的功能分析、在宿主细胞表面表达GFP发光活性的比较测定，以及系列的对展示体系的稳定性及其影响因素的优化实验，从而优选到一种假单胞菌细胞表面展示体系。在此基础上，用对有机磷化物具有特异降解活性的有机磷水解酶基因oph取代所优选体系中的GFP，并导入一种在污水中具有强生活力、并对多种氯酚类化合物具降解活性的假单胞菌受体菌，最终构建成一个具有对有机磷和氯酚类化合物具有降解活性的细胞表面展示体系。是迄今国内外第一例尝试，并具有具有应用潜力。