蒙药十三味红花密诀丸治疗过敏性鼻炎的实验机制研究

Objective: The study of Experimental mechanism of Mongolian thirteen Safflower mijue pills to treat allergic rhinitis (AR). Through the study of the Mongolian thirteen safflower mijue pill,we want to discover the pharmacodynamic mechanism of the Mongolian thirteen safflower mijue pill,the immunologic effector mechanisms and the target of drug action of this treatment. Experimental AR model was induced by ovalbumin in vivo and the pathological slices were collected to find pathological changes. Using Immunohistochemical method detected mucosa tissue ICAM-1, VCAM-1, TLR4, NF-κB a expression and Enzyme linked immune method was used to detect IgE, specific IgE, IL-4, IL-12, histamine, leukotriene contain. As to demonstrate hypothesis that this kind of treatment can improve immune capability. Traditional Chinese medicine and Mongolian medicine combined field is lack of treatment experience , and we are going to looking for new ideas and new methods.

目的：蒙药十三味红花密诀丸治疗过敏性鼻炎(AR)的实验机制研究，从中发现蒙药十三味红花密诀丸的药效学机制，从分子水平探讨红花密诀丸治疗过敏性鼻炎的免疫和药理机制及可能作用的靶点，为蒙医药治疗过敏性鼻炎提供客观的科学依据。方法：采用卵清蛋白鼻粘膜炎症的方法建立大鼠动物模型，并建立不同对照组进行治疗和观察，收集鼻粘膜做常规病理切片，通过光镜、电镜技术观察实验大鼠鼻粘膜组织病理学改变；利用免疫组化方法检测实验大鼠鼻粘膜组织ICAM-1、VCAM-1、 TLR4、NF-κB的表达情况；通过酶联免疫吸附法测定实验大鼠血清总IgE、特异性IgE、IL-4、IL-12、组胺、白三烯含量。通过分析不同数据的变化，探讨十三味红花密诀丸治疗过敏性鼻炎的免疫学机制，以寻求蒙药治疗过敏性鼻炎的新思路和新方法。

背景：该项目主要是对蒙药十三味红花密诀丸治疗过敏性鼻炎(AR)的实验研究，探讨十三味红花密诀丸治疗过敏性鼻炎的发生机制及可能作用的靶点，为蒙医药治疗过敏性鼻炎提供客观的科学依据。 主要研究内容：临床上选取过敏性鼻炎患者进行治疗，可发现症状积分明显降低，并能够有效地降低临床上过敏性鼻炎患者血清中IgE水平。建立AR大鼠模型，通过光镜、电镜技术观察AR大鼠鼻粘膜组织病理学改变；利用免疫组化方法检测AR大鼠鼻粘膜组织ICAM-1、VCAM-1、 TLR4、NF一κBp65的表达显著降低；通过酶联免疫吸附法（ELISA）测定AR大鼠血清总IgE、特异性IgE、IL-4、IL-12、组胺、白三烯含量，结果显示：蒙药十三味红花密诀丸能够有效的改善过敏性鼻炎大鼠血清中这些因子的表达，从而起到治疗过敏性鼻炎的效果；使用实时荧光定量技术（PCR）检测AR大鼠鼻粘膜组织中Th1代表因子IL-2、IFNg和Th2代表因子IL-4、IL-5的mRNA表达情况，蒙药十三味红花秘诀丸可以提高Th1细胞代表因子的表达，降低过敏性鼻炎大鼠Th2细胞代表因子的表达，纠正Th1／Th2细胞免疫失衡；通过蛋白质印迹法（Western-Blot）检测AR大鼠脾脏组织中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-6的表达与PCR表表达相同；同时结合最新研究动态，发现在TLR/NF-кB通路中，用药后miR-146a表达幅度有所升高、miR-155表达有所降低。重要结果：从改善Th1/Th2和TLR4/NF一κB两条通路，治疗过敏性鼻炎。.科学意义：通过RT-PCR、Western-Blot等技术进一步探讨蒙药十三味红花密诀丸治疗过敏性鼻炎的发生机制及作用的靶点。分析不同数据的变化，我们发现十三味红花密诀丸治疗过敏性鼻炎疗效肯定，为蒙药治疗过敏性鼻炎提供了新的思路、方法和科学依据。