广西山绿茶药材炮制的化学机理与药效相关性研究

山绿茶为广西特色中草药，是生产山绿茶降压片等中成药的原料，本品历代本草未见收载。山绿茶为冬青科植物海南冬青Ilex hainanensis Merr.的干燥叶经加工炮制而成。项目组前期研究表明：不同炮制品的主要化学成分有较大改变，对实验动物降血压与降血脂药理作用也有较大影响。本项目拟采用现代药物分析方法和技术，运用多元相关统计方法、LC-MS对化学成分的保留规律与药效进行相关性统计分析，研究山绿茶药材炮制后发挥药效作用的物质基础。同时，利用数学模型，对炮制工艺中各因素条件对有效成分的影响进行系统研究，从而揭示山绿茶炮制引致化学成分变化的机理。本项目的研究对规范该药材的炮制方法和工艺，提高药材疗效，控制药材饮片质量，充分合理利用该药材资源，开发中药新药有积极的作用。

摘要：目的: 对广西特产药材山绿茶Ilex hainanensisMerr.进行不同炮制工艺的实验研究，观察不同炮制工艺山绿茶药材高效液相特征图谱并对其进行质量分析、降血压、降血脂实验研究及其挥发油成分分析，为更好地开发和利用山绿茶药材资源，后续的降压降脂机理研究、临床研究等提供科学依据。方法: 通过清炒、传统炮制、阴干、烘烤、微波方法及不同烘烤时间、烘烤温度、微波时间、微波药材重量等工艺对山绿茶药材进行炮制，采用HPLC法对不同炮制品种药材HPLC特征图谱比较研究，并测定其绿原酸和芦丁的含量来优选不同炮制方法；采用气相色谱-质谱联用仪比较山绿茶药材茎和叶2个部位挥发油成分；采用高脂饲料喂食SD大鼠建立高脂大鼠模型，灌胃不同炮制工艺山绿茶药材醇提物，考察山绿茶对实验性高血脂症大鼠防治作用；降压实验则采用微动脉法测原发性高血压大鼠血压。结果: 山绿茶总黄酮最佳提取工艺为：以50％乙醇为提取溶剂，料液比为1:40，超声提取40min；HPLC法测定山绿茶中芦丁和绿原酸的含量最佳色谱条件：检测波长330nm，流动相为乙腈-0.1%磷酸，梯度洗脱，流速为1.0/min；不同炮制方法山绿茶药材对高脂血症的防治效果为：烘烤炮制药材=传统炮制药材=清炒炮制药材=微波炮制药材>阴干炮制药材；传统炮制品种降压作用最佳，不同烘烤炮制品种中，以200℃烘烤30min组降压作用最佳。不同微波炮制品种中，以60g药材微波11min组降压作用最佳；在GC-MS实验中，从山绿茶茎中鉴定出24个成分，占挥发油总量的94.97%，从叶中鉴定出33个成分，占挥发油总量的98.48%。结论: 初步确定山绿茶最佳炮制方法为传统炮制法，并建立了一种重现性、精密性良好的HPLC含量测定方法；研究了不同种炮制品种山绿茶药材对高血压和高血脂的作用；GC-MS测定中共鉴定出57个成分。