CCND1基因rs9344位点多态性影响汉族女性宫颈癌易感性的机制研究

Human papillomavirus (HPV) infection is the leading cause of cervical cancer. Individual genetic susceptibility differences affect the transformation after HPV infection. Abnormal cell cycle regulation is an important procedure for cervical cells transformation. Cyclin D1 expressed by CCND1 gene is a key protein regulating cell cycles. Our previous experiments showed that CCND1 gene rs9344 polymorphism influence cervical cancer susceptibility of Han women by different expression of subtype cyclin D1b protein, resulting in differences of susceptibility and differentiation. As HPV-16 E7 showed homology with the Rb-binding sites of cyclin D1, we hypothesize that the decline of cyclin D1b may promote the transformation indirectly and may facilitate the transformation into the poor level. This project intends to use in vitro gene transfection, gene silencing, co-immunoprecipitation and reporter gene technology, combined with in vivo experiments and follow-up to investigate the role of cyclin D1b protein in cervical cancer development, differentiation and its value of prognosis, to clarify the mechanism of the rs9344 genotypes different susceptibility, to provide an example for research of genetic risk of cervical cancer, and to help evaluating cervical cancer risk and prognosis.

人乳头瘤病毒（HPV）感染是宫颈癌的首要病因。个体遗传易感性差异影响HPV感染后的恶性转化。细胞周期调控异常是宫颈上皮细胞恶性转化的重要环节。CCND1基因表达的cyclin D1是细胞周期调节关键蛋白。我们前期实验显示CCND1基因rs9344位点多态性影响汉族女性宫颈癌易感性，并通过蛋白亚型cyclin D1b的差异表达影响宫颈癌的个体易感性及宫颈癌的分化程度。由于cyclin D1与HPV-16 E7蛋白Rb结合位点的同源性，我们推测cyclin D1b的减少间接促进宫颈癌的发生，并可能导致其向低分化转化。本课题拟在体外采用基因转染、基因沉默、免疫共沉淀和报告基因等技术，结合体内实验了解cyclin D1b蛋白对HPV感染后宫颈癌发生发展及分化程度的影响，并随访预后。阐明rs9344位点不同基因型易感风险差异的机制，为宫颈癌遗传风险研究提供参考，为评价宫颈癌的易感风险和预后提供帮助。

宫颈癌是威胁女性健康的第二大肿瘤。HPV感染并非宫颈癌病因的全部。个体差异对HPV感染后的走向有重要影响。从遗传学角度来看，个体的遗传易感性差异影响着宫颈癌的发生。本研究旨在了解CCND1基因rs9344位点多态性对汉族女性宫颈癌易感风险的影响，并通过该位点对转录及表达水平的影响推测其不同患病风险的生物学机制，并在体外及体内研究中针对不同易感风险的分子机制进行证实。本研究的前期研究首次发现CCND1基因rs9344位点多态性影响汉族女性对宫颈癌的易感性，并且G等位基因可能由于cyclin D1b的下降导致其对宫颈癌的易感性增加。而A等位基因可能通过cyclin D1b对HPV致癌作用的抑制具有保护性价值。本研究首次发现了cyclin D1b蛋白对宫颈癌起到抑制作用，并且cyclin D1b可能是潜在的宫颈癌治疗靶点。本研究还首次发现宫颈癌组织中miR-195的下降将导致cyclin D1a转录本的负向调控减弱，从而维持cyclin D1a的表达量无明显下降，保持其细胞周期活性和转录因子调节活性。cyclin D1b蛋白的表达还可能对判断宫颈癌的预后起到作用，该部分研究数据仍在整理中。本研究结果首次在汉族人群中揭示了rs9344位点多态性对宫颈癌易感性的价值，并且在机制上研究了这种遗传易感性差异的原因。Rs9344位点基因型的不同，倾向于造成cyclin D1蛋白不同亚型的轻微差异。后续的研究中我们在蛋白层面证实了这种蛋白亚型的差异导致了宫颈癌易感性差异，并且首次发现了cyclin D1b蛋白亚型的对宫颈癌的抑癌作用。除此之外，在cyclin D1蛋白两种亚型的研究中，我们发现对于这两种亚型的调控，miR-195也参与其中，并且miR-195对cyclin D1a亚型的调控产生重要作用，这一结论是对前述遗传易感性机制研究的有益补充。但miR-195的表达是否与rs9344位点遗传多态性相关联尚未证实。在本研究结题时，国内外尚无宫颈癌中针对该位点易感风险的机制研究。我们的研究为宫颈癌发病的遗传风险研究提供了有价值的参考和新的视角，为评价宫颈癌易感风险和预后提供了有意义的帮助。