多巴胺转运蛋白在丙泊酚全麻大鼠苏醒的作用研究

Dopamine transporter inhibitor was administered to rats under general anesthesia of propofol to observe the changes of behavior and EEG during general anesthesia induction and recovery. The expression of dopamine transporter and α -syn in rat ventral tegmental area were detected by immunohistochemistry. The changes of dopamine content in ventral tegmental area of rats were detected by microdialysis and electrochemical technique. The effect of dopamine transporter during propofol general anesthesia in rats was studied. To elucidate the effect of dopamine transporter on propofol. The mechanism of awakening and relieving delirium after operation in rats with general anesthesia, To promote general anesthesia recovery and reduce postoperative delirium to lay a pharmacological foundation.

对丙泊酚全麻大鼠给予多巴胺转运蛋白抑制剂，观察大鼠全麻诱导、苏醒期间行为学及脑电活动变化；应用免疫组化检测大鼠含中脑腹侧被盖区离体脑片多巴胺转运蛋白及α-syn的表达变化；微透析-电化学技术检测大鼠中脑腹侧被盖区多巴胺含量变化。进行多巴胺转运蛋白在丙泊酚全麻大鼠苏醒期间的作用研究。阐明多巴胺转运蛋白变化对丙泊酚全麻大鼠苏醒及减轻术后谵妄的影响机制，为临床促进全麻苏醒及减轻术后谵妄奠定药理基础。

全身麻醉苏醒传统被认为是药物消除的被动过程，受到麻醉药物、患者年龄、身体状况等多方面的影响。在全麻苏醒过程中常出现如苏醒延迟、躁动、谵妄等并发症，探寻加快全身麻醉苏醒的机制有助于临床上提高患者的苏醒期质量、预防苏醒期并发症，也是我们本项目研究所关注的重点。本项目，我们以中脑腹侧被盖区VTA的多巴胺转运蛋白（DAT）为核心的研究靶点。首先通过建立丙泊酚麻醉模型，通过翻正反射消失时间和翻正反射恢复时间对比大鼠丙泊酚麻醉（VTA区DAT敲低或对照）的诱导和苏醒时间，在体脑电记录观察大鼠（VTA区DAT敲低或对照）在丙泊酚麻醉期和苏醒期间的脑电变化，免疫荧光观察VTA内DAT、前额叶皮层c-fos蛋白的表达情况。研究结果提示：通过敲低VTA区DAT，可使大鼠PFC神经元活性增强，促进大鼠从丙泊酚麻醉中苏醒，且通过光遗传和化学遗传实验我们发现VTADA-PBN神经环路的抑制同样延长了丙泊酚麻醉苏醒时间。随后我们建立丙泊酚麻醉下脾切除模型模拟临床PND，通过神经行为学（Morris水迷宫、高架十字迷宫等），分子生物学技术观察海马区α-synuclein、β-Amyloid1-42蛋白聚集情况，发现VTA区DAT参与了老年大鼠由麻醉手术诱发的认知功能障碍，并且与调控海马区α-syn、Aβ1-42蛋白聚集有关。此外，我们拓展研究内容，通过建立丙泊酚干预睡眠剥夺模型，发现丙泊酚不会导致正常大鼠的焦虑，但会导致其REM睡眠减少，而对睡眠剥夺大鼠则能够加快睡眠恢复和减低焦虑水平。对于DAT敲低的睡眠剥夺大鼠，丙泊酚改善睡眠和焦虑水平更慢，尤其是产生更多的REM反弹，说明丙泊酚对睡眠剥夺大鼠的睡眠和焦虑水平的改善可能与VTA区的DAT相关。通过本项目研究，我们明确了VTA区DAT在大鼠接受丙泊酚麻醉苏醒中的作用，为今后开发促麻醉苏醒提供理论依据；同时为睡眠障碍的麻醉治疗学提供新的理论和实验依据，为临床治疗探索新方法和新思路。