以多巴胺能神经元为靶点探讨高催乳激素血症的发病机制及肝脾调控的影响

Hyperprolactinemia is caused by both internal and external factors and is characterized by menoxemia, infertility, excessive lactation, etc. It severely influences the lives and reproductive health of women and is a common as well as difficult clinical disease of gynecology. Bromocriptine mesylate could effectively lower the level of prolactin but the disease is prone to recur once the medication is withdrawn.The project applicant deeply do the research of the follicular development mechanism and the central dopamine regulation channel.Based on previous researches and analysis of epidemiology, we propose that the whether dopaminergic neurons are involved is the key mechanism in hyperprolactinemia. Thie study combines in vivo and in vitro experiments, from multiple levels such as morphology, genes, protein expression, etc, the present experiments studied the regulatory mechanisms of dopaminergic neurons, including mechanisms of oxidative stress, transportation retake, inflammation repair, programmed cell death as well as trophic protection. And whether dopaminergic neurons initiated relevant responsive mechanisms in the onset of hyperprolactinemia was also discussed. Furthermore the treatment of hyperprolactinemia using method of soothing liver and strengthening spleen as well as the mechanisms of regulation of dopaminergic neurons were explored.The implement of this project will provide a theoretical basis for liver and spleen as the core approach to the treatment. To some extent , it enrich the pathogenesis of HPRL.

高催乳激素血症是由内外因素引起的，以月经失调、不孕、溢乳等为特征的综合征，严重影响女性生活与生殖健康，是妇科临床常见病和疑难疾病。甲磺酸溴隐亭能有效降低催乳激素水平，但具有停药后易复发的不足。项目申请人以肝脾藏象及经络理论为指导，在疏肝健脾法临床运用疗效满意的基础上，深入进行了对本病卵泡发育机制和中枢多巴胺调控机制的研究。在前期研究及流行病学分析的基础上我们提出假说：多巴胺能神经元是否参与高催乳激素血症的发病机制。本实验将在体和离体实验结合，从形态学、基因水平、蛋白表达等不同层次研究多巴胺能神经元的调控机制（氧化应激、转运回摄、炎症修复、程序性细胞死亡和营养保护），从而探讨多巴胺能神经元在高催乳激素血症发病环节中是否启动了相关反应机制，进一步探究以疏肝健脾法治疗本病及调节多巴胺能神经元的作用机制。项目实施将为疏肝健脾法论治本病提供理论依据，一定程度上丰富和发展高催乳激素血症的病机研究。

高催乳激素血症是以月经失调、不孕、溢乳等为特征的综合征，严重影响女性生活与生殖健康，是妇科临床常见病和疑难疾病。项目将在体和离体实验结合，从形态学、基因水平、蛋白表达等不同层次研究多巴胺能神经元的调控机制，探讨多巴胺能神经元在高催乳激素血症发病环节中是否启动了相关反应机制，进一步探究以疏肝健脾法治疗本病及调节多巴胺能神经元的作用机制。. 通过糖水偏嗜、体征改变、肝郁评分、旷场实验、悬尾实验、卵巢形态学、酶联免疫法测血清PRL，HE染色观察动情周期，发现复合应激结合药物造模效果最好，更能体现疾病的发病特点;以疏肝健脾法为核心的治疗方法可以上调Nrf2、Keap1、NQO1、SOD2和 HO-1水平，降低MAF水平，通过激活氧化应激通路,保护多巴胺能神经元，调节泌乳素水平进而治疗HPRL;以疏肝健脾法为核心的治疗方法可以上调 PKC、ERK、Zn2+水平，降低 DAT水平，通过激活多巴胺能神经元转运回摄通路,控制细胞外多巴胺浓度，影响多巴胺信号，降低泌乳素水平治疗HPRL;以疏肝健脾法为核心的治疗方法通过上调Cryab、ROS水平,降低iNOS、NOX-2、IBA-1、GFAP、Drd2、 TNF-α、 IL-1β水平，激活炎症修复通路，抑制炎症因子释放，保护多巴胺能神经元，从而调节泌乳素水平治疗HPRL;以疏肝健脾法为核心的治疗方法可以上调 GDNF、TH,同时降低 DA 含量，通过营养保护通路机制，介导细胞增殖、分化，增加脑内多巴胺能神经元的数量及表达，进而改善泌乳素分泌治疗HPRL;以疏肝健脾法为核心的治疗方法可以降低Caspase1、Caspase3、Caspase8、Caspase11、GSDMD-N、TNFR1、 CHOP、AP-1、CFLIP、TOLL样受体1、 TOLL样受体4、 RIP3水平，上调LC3-II、MPTP水平，通过激活细胞凋亡、自噬、焦亡和程序性细胞坏死4种机制，保护多巴胺能神经元，调控泌乳素水平而达到治疗HPRL作用。. 实验验证了以肝脾为核心，运用逍遥散加减方，通过氧化应激机制、转运回摄机制、炎症修复机制、程序性细胞死亡机制和营养保护机制来调控多巴胺能神经元,降低泌乳素水平，从而达到治疗HPRL的目的，丰富了中医药治疗HPRL的中枢机制研究。