维吾尔族慢性淋巴细胞白血病microRNA表达谱筛选验证及其相关分子生物学发病机制的研究

Chronic lymphocytic leukemia (CLL) is a kind of mature B lymphocytes proliferation of tumor, the pathogenesis is still not clear, the study show miRNA expressing may play an important role in the pathogenesis and prognosis of CLL.Domestic studies show that patients of different races have different CLL bias in gene selection.Uighurs and Han have a different genetic background , molecular biology in their disease occurrence and prognosis may exist different performance and impact.Research group sequence Uygur CLL patients and normal individuals by miRNA microarray, Selected Xinjiang Uygur CLL patients differentially expressed miRNA, find the differential expression of miRNA target genes in the international authoritative database, verificate the predicted target gene by vitro luciferase reporter vector, and detecte the miRNA target genes and methylation sensitive gene expression and. regulatory sequence methylation status. Through the above research reveals the abnormal expression of miRNA in the pathogenesis of Uygur in CLL, and compare these indicators with other populations differences. Analysis the miRNA correlation with known prognostic indicators and to investigate the prognostic significance, provide a theoretical basis for the new target for the treatment of CLL.

慢性淋巴细胞白血病(CLL)是一种成熟B淋巴细胞增殖性肿瘤，其发病机制尚未明确，研究发现微小RNA的异常表达在CLL的发病及预后中起重要作用。国内外研究显示不同种族CLL患者在基因的选择上有不同的偏向性。维吾尔族与汉族具有不同的遗传背景，推测分子生物学在其疾病发生及预后可能存在不同的影响。课题组应用miRNA 芯片对维吾尔族CLL患者及正常人测序，筛选维吾尔族CLL患者差异表达的miRNA，在相关数据库查找与CLL密切相关的差异表达miRNA靶基因，通过体外萤光素报告载体验证预测靶基因，并检测miRNA对靶基因、甲基化敏感基因的表达、调控序列甲基化状态的影响。通过上述研究揭示miRNA异常表达在维吾尔族CLL患者的发病机制中的作用，并比较上述指标与国内其他人群的差异性。分析miRNA与目前已知预后指标的相关性并探讨其预后意义，为新疆维吾尔族CLL患者今后的靶向治疗提供科学实验基础。

慢性淋巴细胞白血病(CLL)是一种成熟B淋巴细胞增殖性肿瘤，其发病机制尚未明确，研究发现微小RNA的异常表达在CLL的发病及预后中起重要作用。国内外研究显示不同种族CLL患者在基因的选择上有不同的偏向性。维吾尔族与汉族具有不同的遗传背景，推测分子生物学在其疾病发生及预后是否存在不同的影响。本课题组通过对维吾尔族CLL患者及正常人测序 ，结合文献复习筛选维吾尔族CLL患者差异表达的miRNA。研究结果显示中国维吾尔族与汉族及西方国家CLL患者在常见miRNA表达情况较为一致，如：miR-34a、miR-155、miR-29b、miR-181b、miR-21、miR-150、miR-30e、miR-29a、miR-let-7g等。进一步通过RT-PCR技术，在扩大的样本群中验证了部分差异表达显著的miRNA结果，结果显示中国维吾尔族CLL患者miR-29b、miR-34a、miR-155的表达水平均较同民族正常对照显著上调，miR-181a、miR-181b的表达水平显著下调，而维吾尔族与汉族患者上述五种miRNA表达水平无差异。采用生物信息学技术,结合文献报道筛选出与CLL发生发展密切相关miR-181b的靶基因：CARD11和ZFP36L1。进一步应用荧光素酶载体报告系统及蛋白表达功能试验验证了CARD11和ZFP36L1为miR-181b的靶基因。此外，结合目前已知预后指标：IgHV、P53基因突变，FISH染色体异常等，对差异表达的miRNA进行分析，结果表明CLL患者miR-34a、miR-29b、miR-181b、miR-181a低表达预示着较差的预后。本项目首次完成了中国维吾尔族与汉族及西方CLL患者miRNA差异表达对比研究，这将为国内不同人群CLL患者的分子生物学研究奠定一定的基础。本次研究明确了miR-29b、miR-34a、miR-181a、miR-181b的表达水平与CLL患者疾病发生、发展存在一定的关系，有可能成为CLL患者有价值的预后预测指标，为进一步进行CLL患者分子生物学机制研究提供平台。本研究初步证实了在CLL患者中CARD11及ZFP36L1为miR-181b的靶基因，且miR-181b对其靶基因有负向调控作用，这为下一步探索CLL患者miR-181b调控靶基因的作用机制奠定了基础，并可能为CLL患者靶向治疗提供科学实验基础。